ノロウイルス遺伝子型判別用PCRキット Ver.2による各種遺伝子型に対する網羅性確認試験
ノロウイルス遺伝子型判別用PCRキットVer.2（以下、本製品：製品コード RC122A／RC123A）＊1を用いて網羅性確認試験を行いました。比較として病原体検出マニュアル＊2に準拠した反応系（以下、標準法）を用いた試験も行いました。試薬組成、PCR条件、試験結果を以下に示します。
（PCR条件）
（PCR条件）
本製品では、GI遺伝子型9種(P-type 9種)およびGII遺伝子型27種(P-type 18種)の現在確認されている遺伝子型全てを、安定的に増幅することができた。
第43回 日本食品微生物学会学術総会 発表資料より
（タカラバイオ比較データ）
＊1 Norovirus (GI) RT-PCR Kit for genotyping Ver.2（製品コード RC122A）、Norovirus (GII) RT-PCR Kit for genotyping Ver.2（製品コード RC123A）
＊2 国立感染症研究所「病原体検出マニュアル ノロウイルス （第1版）令和元年6月」
＊3 GI: MON432, GII: MON431
＊4 GI: G1-SKR, GII: G2-SKR
＜試薬組成・PCR条件＞
人工合成遺伝子（DNA）を鋳型とし、GI.1～9および GII.1～27, GXI.1（旧GII.15）の人工合成遺伝子（DNA）を5×104コピー／反応となるよう供し、PCR反応のみを実施しました。電気泳動には、TAE bufferと3％アガロースゲルを使用し、PCR産物5 µlを供して、100 V／25分間の泳動を行いました。本製品（製品コード RC122A/RC123A）
| RT-PCR Mix (NV)-2 | 25 μl |
| Enzyme Mix (NV) | 4 μl |
| GI or GII Primer Mix (NV)-2 | 2 μl |
| 滅菌水 | 17 μl |
| 人工合成遺伝子（鋳型） | 2 μl |
| Total | 50 μl |
（PCR条件）
| 94℃ | 1分 | ||
| 98℃ | 10秒 | 45サイクル | |
| 52℃ | 15秒 | ||
| 68℃ | 30秒 |
標準法
| 2×PCR Buffer for KOD -Multi ＆ Epi- | 25 μl |
| KOD-Multi ＆ Epi- | 1 μl |
| Forward primer(10 μM)＊3 | 2.5 μl |
| Reverse primer(10 μM)＊4 | 2.5 μl |
| 滅菌水 | 17 μl |
| 人工合成遺伝子（鋳型） | 2 μl |
| Total | 50 μl |
（PCR条件）
| 94℃ | 2分 | ||
| 98℃ | 10秒 | 45サイクル | |
| 50℃ | 15秒 | ||
| 68℃ | 30秒 |
＜結果(GI)＞
Marker：100 bp ladder、GI目的産物鎖長：579 bp＜結果(GII)＞
Marker：100 bp ladder、GII目的産物鎖長：570 bp本製品では、GI遺伝子型9種(P-type 9種)およびGII遺伝子型27種(P-type 18種)の現在確認されている遺伝子型全てを、安定的に増幅することができた。
第43回 日本食品微生物学会学術総会 発表資料より
（タカラバイオ比較データ）
＊1 Norovirus (GI) RT-PCR Kit for genotyping Ver.2（製品コード RC122A）、Norovirus (GII) RT-PCR Kit for genotyping Ver.2（製品コード RC123A）
＊2 国立感染症研究所「病原体検出マニュアル ノロウイルス （第1版）令和元年6月」
＊3 GI: MON432, GII: MON431
＊4 GI: G1-SKR, GII: G2-SKR
