PrimeSTAR® GXL Premix Fastシリーズ

PrimeSTAR® GXL Premix Fastの伸長性と高速性

（1）伸長性

PrimeSTAR GXL Premix Fast（製品コード R053A）は優れた伸長性を有し、一般にHigh Fidelity PCR酵素では増幅しづらい長鎖の鋳型DNAにおいても、PCR伸長時間 5 sec./kb（10 kb以上:10 sec./kb）で増幅が可能です。
ヒトゲノムDNAを鋳型として30 kbまでの増幅を確認し、30 kbの増幅にかかる時間は2時間56分でした。

鋳型：ヒトゲノムDNA（100 ng/50 μl反応系）
1．p530.5 kb
2．DCLRE1A1 kb
3．DCLRE1A2 kb
4．DCLRE1A4 kb
5．β-globin8.5 kb
6．β-globin15 kb
7．β-globin20 kb
8．β-globin24 kb
9．β-globin27 kb
10．β-globin30 kb
M．λ-Hind III digest

①PrimeSTAR GXL
Premix Fast
（製品コード R053A）
②PrimeSTAR GXL
Premix
（製品コード R051A）
③A社酵素
④B社酵素
（弊社比較データ）
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鋳型の鎖長と
所要時間		①製品コード R053A②製品コード R051A③A社酵素④B社酵素
2 kb39分1時間39分1時間9分1時間16分
8.5 kb55分4時間54分3時間27分3時間1分
30 kb2時間56分7時間57分10時間37分16時間15分
＊PCR条件
（伸長時間）		増幅鎖長
≦ 10 kb：5 sec./kb
＞10 kb：10 sec./kb		増幅鎖長
≦ 10 kb：1 min./kb
10 kb～30 kb: 10min.
≦ 30 kb：15 min.		増幅鎖長
≦ 6 kb：30 sec./kb
＞ 6 kb：40 sec./kb		増幅鎖長
≦ 1 kb：15 sec./kb
2 kb～10 kb：30 sec./kb
＞ 10 kb：1 min./kb
反応条件：各社推奨条件で実施＊
サーマルサイクラー：Clontech PCR Thermal Cycler GP（製品コード WN400）使用
A社酵素、B社酵素：High Fidelity PCR酵素

（2）高速性

PrimeSTAR GXL Premix Fast, Dye Plus（製品コード R052A）とPrimeSTAR GXL Polymerase（製品コード R050A＊）、C社酵素を用い、ヒトゲノムDNAを鋳型とし伸長時間「10 sec.」にて増幅した。
PrimeSTAR GXL Premix Fast, Dye Plus（製品コード R052A）とPrimeSTAR GXL Polymerase（製品コード R050A＊）は6 kbまで良好な増幅が見られた。

鋳型：ヒトゲノムDNA（100 ng/50 μl反応系）
1．p530.5 kb
2．DCLRE1A1 kb
3．DCLRE1A2 kb
4．β-globin3 kb
5．DCLRE1A4 kb
6．p536 kb
7．Human, Gene of Interest7.5 kb
M．λ-Hind III digest


①PrimeSTAR GXL
Premix Fast, Dye plus
（製品コード R052A）
②PrimeSTAR
GXL Polymerase
（製品コード R050A＊）

③C社酵素

（弊社比較データ）
PCR条件：
98℃
55℃
68℃
10 sec.
5 sec.
10 sec.
30 cycles
＊製品コード R050A：高速PCRプロトコールにて実施

サーマルサイクラー：TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient（終売）使用
C社酵素：High Speed PCR酵素

  PrimeSTAR® GXL Premix Fastシリーズ