PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2

増幅鎖長

(1)ヒトゲノムDNA

ヒトゲノムDNAを鋳型として、各社推奨PCR条件にて増幅可能なサイズを確認しました。
PrimeSTAR Max DNA Polymerase Ver.2(製品コード R047A)では、伸長時間5 sec./kbまたは10 sec./kbの高速反応において15 kbまでの良好な増幅を確認しました。15 kbの増幅にかかる時間は1時間42分でした。

鋳型:ヒトゲノムDNA(100 ng/50 μl反応系)
1. 0.5 kb
2. 1 kb
3. 2 kb
4. 3 kb
5. 4 kb
6. 7.5 kb
7. 10 kb
8. 15 kb

所要時間
(15 kb)
①PrimeSTAR Max
DNA Polymerase Ver.2
(製品コード R047A)


1時間42分
②PrimeSTAR Max
DNA Polymerase
(製品コード R045A)

1時間42分
③A社酵素

4時間12分
④B社酵素

4時間12分
(弊社比較データ)

反応条件:各社推奨条件で実施

PrimeSTARのPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
68℃

10 sec.
5 or 15 sec.
5 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長>6 kb
98℃
68℃

10 sec.
10 sec./kb
30 cycles
A社およびB社酵素のPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
60℃
72℃

10 sec.
10 sec.
30 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長>6 kb
98℃
68℃

10 sec.
30 sec./kb
30 cycles


サーマルサイクラー:Clontech PCR Thermal Cycler GP(製品コード WN400)使用
A社酵素、B社酵素:High Fidelity PCR酵素

(2)ヒトcDNA

ヒトcDNAを鋳型として、各社推奨PCR条件にて増幅可能なサイズを確認しました。
PrimeSTAR Max DNA Polymerase Ver.2 (製品コード R047A)では、伸長時間10 sec./kbの高速反応において6 kbまでの良好な増幅を確認しました。また、伸長時間20 sec./kbの反応において8 kbの良好な増幅を確認しました(12 kbの増幅も視認できました)。6 kbの増幅にかかる時間は1時間6分でした。

鋳型:ヒト cDNA(Total RNA 250 ng相当/50 μl反応系)
1. 1 kb
2. 2 kb
3. 4 kb
4. 6 kb
5. 8 kb
6. 12 kb

所要時間
(6 kb)
①PrimeSTAR Max
DNA Polymerase Ver.2
(製品コード R047A)


1時間6分
②PrimeSTAR Max
DNA Polymerase
(製品コード R045A)

1時間6分
③A社酵素

2時間7分
④B社酵素

2時間7分
(弊社比較データ)

反応条件:各製品推奨条件で実施

PrimeSTAR Max DNA Polymerase Ver.2のPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
68℃

10 sec.
5 or 15 sec.
10 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長>6 kb
98℃
68℃

10 sec.
20 sec./kb
30 cycles
PrimeSTAR Max DNA PolymeraseのPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
72℃

10 sec.
5 or 15 sec.
10 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長>6 kb
98℃
72℃

10 sec.
20 sec./kb
30 cycles
※鋳型がcDNAの場合、上記の伸長時間で設定

A社およびB社酵素のPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
72℃

10 sec.
10 sec.
30 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長>6 kb
98℃
72℃

10 sec.
30 sec./kb
30 cycles


サーマルサイクラー:Clontech PCR Thermal Cycler GP(製品コード WN400)使用
A社酵素、B社酵素:High Fidelity PCR酵素

  PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2