| | 動物組織 | 細胞 |
| 1 | サンプルの準備 | 2.5 mg＊1の組織を用意する。液体窒素を加え、凍結しながら乳鉢で粉状にする、またはホモジナイザーによる処理などで細分化処理を行う。 | 104個までの培養細胞をBuffer T1 80 μlに懸濁する。 |
| 2 | Proteinase K処理 |
 | Buffer T1 80 μl, Proteinase K＊2 8 μlを組織に添加し、vortex（5秒間×2）を行う。56℃で1～4時間（または一晩）インキュベートする。
（Option）RNase処理を行う場合：Proteinase K処理後、RNase A（20 mg/ml）溶液(各自で用意）＊3 20 μlを加え、室温で5分インキュベートする。 |
| Proteinase K 8 μlを組織に添加し、vortex（5秒間×2）を行う。56℃で10分間インキュベートする。
（Option）RNase処理を行う場合：Proteinase K＊2処理後、RNase A（20 mg/ml）溶液（各自で用意）＊3 20 μlを加え、室温で5分インキュベートする。 |
| 3 | サンプルの溶解 |
 | サンプルを攪拌する。Buffer B3 80 μlを加えて、vortex（5秒間×2）を行った後、70℃で5分間インキュベートする。
室温までクールダウンする。
不溶物が残る場合は、11,000×g, 5分間遠心し、上清を新しいチューブに移す。
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| 4 | エタノールの添加 |
 | 96～100％エタノール 80 μlを添加し、よく混合する。
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| 5 | カラムへの吸着 |
 | NucleoSpin Tissue XS Column（緑のリング）をCollection Tube（2 ml）にセットする。
4の溶液をカラムに添加し、11,000×g, 1分間遠心する。
ろ液を捨てた後、新しいCollection Tube（2 ml）にカラムをセットする。
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| 6 | メンブレンの洗浄 |
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1回目の洗浄
Buffer B5＊4 50 μlをカラムに添加し、11,000×gで1分間遠心する。
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2回目の洗浄
Buffer B5＊4 50 μlをカラムに添加し、11,000×gで2分間遠心する。
ろ液とCollection Tubeを捨てる。
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| 7 | DNAの溶出 |
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カラムをマイクロチューブ（1.5 ml: 各自で用意）にセットする。
Buffer BE* 20 μlをメンブレンの中央に加え、11,000×gで1分間遠心する。
溶出したDNA溶液は、4℃、長期保存の場合は、－20℃で保存する。（凍結融解はできるだけ繰り返さない）
Buffer BEの組成 : 5 mM Tris-HCl, pH 8.5 |
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残存エタノールの除去
（オプション）
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チューブの蓋をあけたまま、溶出液を90℃、8分で加熱する。
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