| 試薬の準備 |
| |
Buffer RCU＊1, Buffer RA3＊2が添付の英文説明書に従って調製、希釈されていることを確認する。
|
|
| 1．サンプルの準備 |
 | 300 μlまでのRNAサンプル（90 μｇまで）を用意し、マイクロチューブ（各自で用意）に入れる。
100 μl以下のサンプルはRNase-free H2Oを加えて100 μlにする。100～200 μlのサンプルは同様に200 μlにする。
|
|
| 2. Bufferの添加 |
 |
ステップ1で準備したRNAサンプルに等量のBuffer RCU＊1を添加し、vortexで5秒間×2回混合する。
軽くスピンダウン（1,000×g、1秒間程度）して蓋についた液を落とす。
|
|
| 3. カラムへの吸着 |
 |
NucleoSpin RNA XS Column(水色のリング)をCollection tube（2 ml）にセットする。
2．の溶液を300 μlまでカラムに添加し、11,000×g、30秒間遠心する。
2．の溶液が残っている場合は、ろ液を捨て、2．の溶液を300 μlまで添加した後、同様に遠心する。すべての2．の溶液をカラムに添加するまでこの作業を繰り返す。
ろ液を捨て、新しいCollection Tube（2 ml）にカラムをセットする。
|  |
|
| 4. メンブレンの洗浄 |
 |
1回目の洗浄
Buffer RA3＊2 400 μlをカラムに添加し、11,000×gで30秒間遠心する。
ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。
| |
2回目の洗浄
Buffer RA3＊2 200 μl をカラムに添加し、11,000×gで2分間遠心してメンブレンを乾燥させる。
ろ液を捨てた後、Nuclease-free Collection Tube（1.5 ml）にカラムをセットする。
| |
|
| 5. DNAの溶出 |
 |
カラムにRNase-free H2O 10 μl＊3を添加し、11,000×gで30秒間遠心してRNAを溶出させる。
| |
|
