試薬の調製 | Buffer B5*1が添付の英文説明書に従って調製、希釈されていることを確認する。 | |
1. | サンプルの準備 |
![]() ![]() Buffer BE 100 μlを加えて、再懸濁する。 |
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2. | サンプルの溶解 |
![]() ![]() 市販の振盪破砕機などを用いて、Bead Tube中の微生物を破砕する。*2 Bead Tubeを11,000×g、30秒間遠心して、蓋についた試料を落とすとともに、泡を消去する。 |
3. | Bufferの添加 |
![]() ![]() Bead Tubeを11,000×g、30秒間遠心する。 |
4. | カラムへの吸着 |
![]() ![]() 3. の上清500~600 μlをカラムに加え、11,000×g、30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、新しい2 mlのCollection Tubeにカラムをセットする。 |
5. | メンブレンの洗浄 |
![]() ![]() ![]() Buffer BW 500 μlをカラムに添加し、11,000×gで30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、同じCollection Tubeにカラムをセットする。 2回目の洗浄 Buffer B5 500 μlをカラムに添加し、11,000×gで30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、同じCollection Tubeにカラムをセットする。 |
6. | メンブレンの乾燥 |
![]() ![]() カラムをCollection Tubeのろ液に触れないよう取り出す。 |
7. | DNAの溶出 |
![]() ![]() Buffer BE 100 μlを添加し、蓋を閉めて、1分間室温で放置する。 11,000×gで30秒間遠心し、DNAを溶出させる。 |