NucleoSpin Microbial DNAは、グラム陰性菌、グラム陽性菌、酵母、糸状菌などの微生物から高純度にゲノムDNAを抽出、精製するキットである。本製品の操作は、まず、製品に含まれるMN Bead Tubes Type B中のガラスビーズを用いてProteinase Kの存在下で試料を破砕する。この際には一般的な細胞破砕装置を使用することができる。Proteinase Kが含まれているため、新たに菌体溶解酵素を準備する必要はなく、1回の処理で様々な微生物サンプルを破砕することができる。菌体破砕後は、カオトロピック塩の存在下でDNAをカラムに吸着させ、2回の洗浄後、ゲノムDNAを溶出する。迅速、シンプルな操作で、収率良くゲノムDNAを得ることができる。
MN Bead Tubesは、サンプルの種類に適したものを使用する。グラム陰性菌、グラム陽性菌にはキットに含まれるMN Bead Tubes Type B（別売：製品コード 740812.50）がそのまま使用できる。酵母、糸状菌にはMN Bead Tubes Type C（製品コード 740813.50）、土壌、堆積物サンプルにはMN Bead Tubes Type A（製品コード 740786.50）が別途必要である。

（注）本製品の使用には撹拌式細胞破砕装置が必要です。

原理	シリカメンブレン法
形状	ミニスピンカラム
サンプル量	＜40 mg 湿菌体
精製サイズ	200 bp～約50 kb
回収量	5～25 μg(30 mg 湿菌体) サンプルの種類、破砕方法に依存
A260/280	1.6～2.0
溶出液量	100～200 μl
精製時間	35分
結合容量	60 μg

NucleoSpin Microbial DNA（製品コード 740235.10/.50）
・Lysis Buffer MG
・Wash Buffer BW
・Wash Buffer B5 (Concentrate)
・Elution Buffer BE^＊1
・Liquid Proteinase K
・MN Bead Tubes Type B
・NucleoSpin Microbial DNA Columns
・Collection Tubes (2 ml)
*1 組成：5 mM Tris-HCl, pH8.5

MN Bead Tubes Type A（製品コード 740786.50）^＊2
・0.6～0.8 mm ceramic beads/2 ml Tube
推奨サンプル：土壌、堆積物
*2 NucleoSpin Soil（製品コード 740780.10/.50/.250）に含まれるものと同じ

MN Bead Tubes Type B（製品コード 740812.50）^＊3
・40～400 μm glass beads/2 ml Tube
推奨サンプル：グラム陽性菌、グラム陰性菌
*3 NucleoSpin Microbial DNA（製品コード 740235.10/.50）に含まれるものと同じ

MN Bead Tubes Type C（製品コード 740813.50）^＊4
・1～3 mm corundum/2 ml Tube
推奨サンプル：酵母、糸状菌
*4 NucleoSpin DNA Yeast（製品コード 740236.10/.50）に含まれるものと同じ

室温

試薬
　　96～100％エタノール

器具
・1.5 mlマイクロ遠心チューブ
・ピペットチップ（滅菌済）
・ピペット
・微量高速遠心機
・推奨細胞破砕装置：
　　Vortex-Genie 2 (サイエンティフィックインダストリーズ社)＋MN Bead Tube Holder（製品コード 740469）
　　撹拌式細胞破砕装置（Retsch社NM200など）


MN Bead Tube Holder（製品コード 740469）
この製品の使用方法はこちらをご覧ください。

・Schwingmühle MM200, MM300, MM400 (Veder Scientific社)
・FastPrep System (MP-Biomedicals社)
・Precellys (Bertin Technologies社)
・MagNa Lyser (Roche社)
・TissueLyser II and Tissue Lyser LT (QIAGEN社)
・Bullet Blender (Next Advance社)
・Mini-Beadbeater (Biospec Products社)
・Speed Mill (Analytik Jena社)
・Vortex Adapter for Vortex-Genie 2 X (MoBio社)

図1．微生物サンプルからのDNA抽出
NucleoSpin Microbial DNA KitとMN Bead Tubes Type B（キットに含まれる）、またはMN Bead Tubes Type C（別売）を用いて様々な微生物サンプルからゲノムDNAを抽出した。
抽出DNA各100 ngをアガロースゲル電気泳動で調べた結果、全てのサンプルでRNAの混入やDNAの分解のない高分子のゲノムDNAが確認された。

1．Escherichia coli,　MN Bead Tubes Type B
2．Vibrio fischerii,　MN Bead Tubes Type B
3．Bacillus subtilis,　MN Bead Tubes Type B
4．Corynebacterium glutamicum,　MN Bead Tubes Type B
5．Saccharomyces cerevisiae,　MN Bead Tubes Type C

NucleoSpin Microbial DNAで使用実績のある微生物

Microorganisms	Tested by
Acinetobacter	Customer
Aspergillus spec.	MN
Bacillus subtilis	Customer
Clostridium ljungdahlii	Customer
Corynebacterium glutamicum	MN
Escherichia coli	MN
Eurotium spec.	Customer
Klebsiella pneumoniae	Customer
Microbacterium spec.	Customer
Pichia pastoris	Customer
Pseudomonas aeruginosa	Customer
Rhizopus spec.	MN
Saccharomyces cerevisiae	MN
Staphylococcus pneumoniae	Customer
Streptococcus pneumonieae	Customer
Trametec spec.	Customer
Vibrio fischerii	MN

MN：マッハライ・ナーゲル社でテストした菌株種
Customer：ユーザー様よりご報告のあった菌株種

NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。