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製品説明
TaKaRa LA PCR Kit Ver.2.1は、LA PCRテクノロジーの効果を最大に引き出すためにチューンアップしたキットである。LA PCR用に最適化した専用バッファー(LA PCR Buffer II)とTaKaRa LA Taq との組合せによりヒトゲノムDNAを鋳型にした長鎖DNAの増幅が可能であるだけでなく、GC rich 専用バッファー(GC Buffer I、II) の使用により、GC含量が高い鋳型の増幅やリピート配列の増幅においても威力を発揮する。もちろん種々の鋳型DNAに応用可能であり、短いDNAの増幅にも利用できる。さらにMg2+ freeのバッファーの添付により、反応液組成の条件検討も行える。
内容
(50μl PCR 50回分)
TaKaRa LA Taq (5 U/μl) | 125 U |
dNTP Mixture(各2.5 mM) | 400 μl |
10×LA PCR Buffer II(Mg2+ plus)(Mg2+濃度25 mM) |
250 μl |
10×LA PCR Buffer II (Mg2+ free) |
250 μl |
MgCl2(25 mM ) |
500 μl |
Control Template(100 ng/μl HL60由来ゲノムDNA) |
10 μl |
Control Primer LA3(10 μM) |
10 μl |
Control Primer LA4(10 μM) |
10 μl |
λ-Hind III digested MW Marker (100 ng/μl) | 20 μl |
2×GC Buffer I (Mg2+ plus)* (Mg2+濃度5 mM) |
1.25 ml |
2×GC Buffer II (Mg2+ plus)* (Mg2+濃度5 mM) |
1.25 ml |
Control Primer GC1(10 μM) |
10 μl |
Control Primer GC2(10 μM) |
10 μl |
*増幅領域がGC richあるいは強固な二次構造をとると思われる場合、まず2×GC Buffer Iをご使用ください。GC Buffer Iで増幅しにくい場合には2×GC Buffer IIをご使用ください。改善される場合があります。
【注意】GC Buffer IおよびGC Buffer IIを用いた場合、LA PCR Buffer IIを用いた場合に比べてPCR産物のエラー率が高くなりますので、ご注意ください。
保存
-20℃
Control Primer配列
※ Control Templateの17.5 kbを増幅する。
Control Primer GC1 |
:5’-GGGAGGGGACCGGGGAACAGAG-3’ |
Control Primer GC2 |
:5’-GAACAGTCCGTCACTTCACGTG-3’ |
※ Control TemplateのGC rich 領域1,255 bpを増幅する。