pUC118/119 タイプベクター

pUC118/pUC119ベクターは、pUC18/pUC19内に、M13ファージDNAのintergenic region（IG）を挿入したプラスミドである。ヘルパーファージM13KO7の感染により、pUC118/pUC119は一本鎖DNAとなり、優先的にファージ粒子内に包みこまれ、菌体外に放出される。
このシステムを用いることで、大きなDNAフラグメントでも欠失が起こることなく、安定して一本鎖DNAが得られる。
なお、pUC118はpUC18と、pUC119はpUC19とそれぞれ全く同じクローニングサイトを持っており、IPTGとX-Galを含むプレートで外来DNAの挿入の有無を容易に判別できる。
制限酵素切断BAP処理済みpUC118は、マルチクローニングサイトで1ヵ所のみ切断する比較的使用頻度の高い制限酵素を用いてpUC118を消化し、大腸菌由来アルカリフォスファターゼ（BAP）により脱リン酸化を行ったクローニングベクターである。そのままでクローニングに使用することができ、ベクターだけのセルフライゲーションが防げ、形質転換細胞のブランク値を下げることができる。
pTV118Nは、pUC118と同様、一本鎖DNA調製が可能なプラスミドベクター（ファージミドベクター）であるが、外来遺伝子を直接発現可能にすべくpUC118を改変したものである。pTV118N上のlacZαの開始コドン（ATG) の位置にNco I切断配列（CCATGG）が導入してある。
このNco I 部位に外来遺伝子を挿入し、翻訳のフレームを合わせれば、lacプロモーター、lacZのSD配列およびその開始コドンを利用して、外来遺伝子の誘導発現を行うことができる。SD配列と開始コドン間の塩基数は、翻訳開始効率が高いといわれている8塩基になっている。
なお、翻訳のフレームを合わせた外来遺伝子のクローニングのために、３種類のNco Iリンカーを別売りしている。
さらに、ヘルパーファージを用いて、一本鎖DNAとして回収し、RV-Nプライマーを用いてシーケンシングを行えば、開始コドン側から塩基配列を読み取ることができ、翻訳フレームの確認が容易に行える。

－20℃

10 mM	Tris-HCl（pH8.0）
1 mM	EDTA

	Entry Name	Accession No.
pUC118	CVU07649	U07649
pUC119	CVU07650	U07650

注）GenBankに登録されているpUC118の配列は2540位がＣであるが、タカラバイオで販売しているpUC118ベクターは2540位がＴである。 また、GenBank登録のpUC119の配列は597位、852位、901位および2540位がＣであるが、タカラバイオで販売しているベクターはこれらの位置がＴである。

pUC118, pUC119, pTV118NのDNAシーケンスデータ

pUC118/119：3,162 bp
pTV118N：3,163 bp

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

●外来遺伝子のクローニング
●M13 Primersを用いたDNAシーケンシング
●Kilo-Sequence用Deletion Kit（製品コード 6030）を用いたキロシーケンシング
●lacプロモーターを利用した遺伝子発現

pTV118Nは、lacZ領域に対するM13 IG領域の向きが、pUC118の場合とは逆向きであるのでM13 forwardプライマーを用いて一本鎖DNAをシーケンシングすることはできない。