SOC培地添付
製品説明
α-相補性選択宿主E. coli JM109
E. coli JM109は、pUC系プラスミドベクターDNAでの形質転換やM13ファージベクターDNAでの形質導入等を行う際に、ベクターDNAより生成するlacZαペプチドとJM109F'にコードされるlacZΔM15とによるβ-ガラクトシダーゼの活性回復（α-相補性）を利用することにより、組換え体の選別を容易にする菌株である。
F'プラスミドを有するため、遺伝子ライブラリーの作製やサブクローニングの他に、M13ベクターDNAの宿主として一本鎖DNAの調製にも利用できる。
E. coli JM109は、pUC系プラスミドベクターDNAでの形質転換やM13ファージベクターDNAでの形質導入等を行う際に、ベクターDNAより生成するlacZαペプチドとJM109F'にコードされるlacZΔM15とによるβ-ガラクトシダーゼの活性回復（α-相補性）を利用することにより、組換え体の選別を容易にする菌株である。
F'プラスミドを有するため、遺伝子ライブラリーの作製やサブクローニングの他に、M13ベクターDNAの宿主として一本鎖DNAの調製にも利用できる。
内容
| E. coli JM109 Electro-Cells | 50 μl×10本 |
| pUC19 DNA (10 pg/μl) | 10 μl |
| SOC Medium* | 1 ml×10本 |
* SOC Mediumの組成 ：
【ご注意】| 2％ | Tryptone | |
| 0.5％ | Yeast extract | |
| 10 mM | NaCl | |
| 2.5 mM | KCl | |
| 10 mM | MgSO4 | |
| 10 mM | MgCl2 | |
| 20 mM | Glucose |
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。
保存
－80℃
E. coli JM109 Genotype
recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17(rK- mK+), e14- (mcrA-), supE44, relA1, Δ
(lac-proAB)/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZΔM15]
Cell density
＞1×1010 bacteria/ml
品質
1）
形質転換効率
10 pgのプラスミド DNAを用いて形質転換した場合
50 μl E. coli JM109 Electro-Cells /10 pg pUC19 plasmid
＞1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid DNA
2）F'プラスミドの安定性
pUC19DNAを用いて形質転換を行い 、100 μg/mlのアンピシリン、 0.2 mM IPTG、40 μg/ml X-Galを含むLB-寒天培地にプレートした場合、白色のコロニーの出現率は1％以下である。
10 pgのプラスミド DNAを用いて形質転換した場合
50 μl E. coli JM109 Electro-Cells /10 pg pUC19 plasmid
＞1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid DNA
2）F'プラスミドの安定性
pUC19DNAを用いて形質転換を行い 、100 μg/mlのアンピシリン、 0.2 mM IPTG、40 μg/ml X-Galを含むLB-寒天培地にプレートした場合、白色のコロニーの出現率は1％以下である。
プラスミドスクリーニングに使用する抗生物質と選択濃度
| 抗生物質 | アンピシリン | カナマイシン | クロラムフェニコール | ストレプトマイシン | テトラサイクリン |
|---|---|---|---|---|---|
| 濃度（μg/ml） | 100 | 50 | 20 | 50 | 20 |
- 注意事項
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