SOC培地添付
製品説明
pUC系プラスミドを使用して遺伝子ライブラリーの作製、サブクローニングを行う場合、本宿主菌と組み合わせると、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用してX-Galによる青白選択を行うことができ、組換え体の選別が容易となる。
内容
| E. coli DH5α electro-Cells | 50 μl×10本 |
| pUC19 DNA (10 pg/μl) | 10 μl |
| SOC Medium* | 1 ml×10本 |
* SOC Mediumの組成 ：
【ご注意】| 2％ | Tryptone | |
| 0.5％ | Yeast extract | |
| 10 mM | NaCl | |
| 2.5 mM | KCl | |
| 10 mM | MgSO4 | |
| 10 mM | MgCl2 | |
| 20 mM | Glucose |
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。
保存
－80℃
E. coli DH5α Genotype
F-, Φ 80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF)U169, deoR, recA1, endA1, hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA1
Cell density
＞1×1010 bacteria/ml
品質
1）形質転換効率
10 pgのプラスミドDNAを用いて形質転換した場合
50 μl E. coli DH5α Electro-Cells/10 pg pUC19 plasmid
＞1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid DNA
2）β-ガラクトシダーゼのα-相補性の確認
pUC19 DNAを用いて形質転換を行い、 100 μg/mlのアンピシリン、60 μg/ml X-Galを含むLB-寒天培地にプレートした場合、青色のコロニーが出現することを確認している。
10 pgのプラスミドDNAを用いて形質転換した場合
50 μl E. coli DH5α Electro-Cells/10 pg pUC19 plasmid
＞1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid DNA
2）β-ガラクトシダーゼのα-相補性の確認
pUC19 DNAを用いて形質転換を行い、 100 μg/mlのアンピシリン、60 μg/ml X-Galを含むLB-寒天培地にプレートした場合、青色のコロニーが出現することを確認している。
プラスミドスクリーニングに使用する抗生物質と選択濃度
| 抗生物質 | アンピシリン | カナマイシン | クロラムフェニコール | ストレプトマイシン | テトラサイクリン |
|---|---|---|---|---|---|
| 濃度（μg/ml） | 100 | 50 | 20 | 50 | 20 |
- 注意事項
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