E. coli HST04 dam－/dcm－ Competent Cells

damおよびdcmメチラーゼ欠損株
SOC培地添付
製品コード メーカー
略称		 製品名 容量 価格（税別） 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報		 参考資料 カート
Takara Code
9129

TKR

タカラバイオ（株）
 E. coli HST04 dam－/dcm－ Competent Cells
労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
10 transformations ￥35,000
 説明書・データシート・ベクター情報 個
9129
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製品説明

コンピテントセルは、外来DNAを取り込む能力を持つ受容菌で、遺伝子組換え体プラスミドなどを取り込む。形質転換、形質導入などが、効率良く確実に行えるコンピテントセルが必要となる。タカラバイオでは、Hanahanの方法に改良を加え、このコンピテントセルを調製した。
E. coli HST04 dam－/dcm－は本来大腸菌が持っているメチル化遺伝子dam、dcmを欠損しているため、DNAが大腸菌によりメチル化されることがない。本製品で調製されたplasmidはdamまたはdcm methylaseの影響を受ける制限酵素で切断することが可能である。
なお、dam、recAの2重変異株は致死になるため、本株はrecA＋株になっている。このため、反復配列をもつような外来DNAはrecA遺伝子により、組換えが起こることが予想される。
本製品はクローニング用の宿主には適していない。形質転換の際には、あらかじめ構築されたプラスミドの使用をお勧めする。

内容

E. coli HST04 dam－/dcm－ Competent Cells100 μl×10本
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium*1 ml×10本
*SOC Mediumの組成：
2%Tryptone
0.5%Yeast extract
10 mMNaCl
2.5 mMKCl
10 mMMgSO4
10 mMMgCl2
20 mMGlucose
【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

保存

－80℃

品質

形質転換効率
プラスミドベクターを用いて形質転換する場合の方法により1 ngのpUC19 DNAで形質転換し、Amp+のプレートでコロニーを選別した。
このとき、＞ 1×106 colonies/μg・pUC19 プラスミドDNAの効率を得た。

Genotype

F－, ara, Δ(lac-proAB)[Φ80dlacZΔM15], rpsL(str), thi, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, dam, dcm

Cell density

1～2×109 bacteria/ml

プラスミドスクリーニングに使用する抗生物質と選択濃度

抗生物質アンピシリンカナマイシンクロラムフェニコールストレプトマイシンテトラサイクリン
濃度（μg/ml）1005020NA20

BIO VIEW / Clontechniques

これからのクローニングはハイクオリティーコンピテントセルで！！

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注意事項
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