Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells

Agrobacterium tumefaciens（Rhizobium radiobactor）は、自身の持つTiプラスミドの一部であるT-DNA（transfer DNA）を宿主植物の細胞内に移行させ、植物染色体DNAに挿入した後にT-DNA上の遺伝子を発現させることにより、感染部位にクラウンゴール（Crown gall）を形成させる。この仕組みを利用して、T-DNA上の病原性遺伝子を取り除き、選択マーカー遺伝子とともに目的外来遺伝子に置き換えることにより、宿主植物の細胞、核DNAに外来遺伝子を移行させ（Agrobacterium-mediated gene transfer）、植物を形質転換するバイナリーベクター法が考え出された^1）。
Agrobacterium tumefaciens LBA4404株はバイナリーベクター法の開発者であるオランダのライデン大学の P. J.J.Hooykaas教授らが開発した菌株^2）で、T-DNAのvir領域（T-DNAの切り出しから移行に関わる遺伝子が存在）のみを含むプラスミドpAL4404を保有しており、植物の形質転換での多くの使用実績がある。
本製品は、バイナリーベクター法に使用されるベクターDNAを菌体内に導入するためのエレクトロポレーション法^3）用のコンピテントセルとして調製されており、得られた形質転換A. tumefaciensは様々な植物の感染実験（形質転換実験）に使用できる。

Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells	40 μl×5
pRI 900 DNA*1（1 ng/μl）	10 μl
SOC Medium*2	1 ml×10

*1 pRI 900 DNA：pRI 910 DNA（製品コード 3261）からマルチクローニングサイトを除いたプラスミドDNAである。
*2 SOC Mediumの組成：

2％	Tryptone
0.5％	Yeast extract
10 mM	NaCl
2.5 mM	KCl
10 mM	MgSO4
10 mM	MgCl2
20 mM	Glucose

【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

－80℃
注意：保存は－80℃で行います。温度管理が不十分な場合、形質転換効率が低下することがあります。そのような事態が予想される場合は、付属のpRI 900 DNAを用いて形質転換効率を確認の上、使用してください。
液体窒素では保存しないでください。

使用方法に従って、1 ngのpRI 900 DNAで形質転換し、カナマイシンおよびストレプトマイシンを含むプレートでコロニーを選別した。
この時、＞5×10⁶ colonies/μg・pRI 900 DNAの効率を得た。