SP6 RNA Polymerase

Cloned
反応用バッファー添付
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
2520A

TKR

タカラバイオ(株)
SP6 RNA Polymerase
修飾酵素
3,000 U ¥21,000
¥16,800
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
2520A
2520B(A×5)

TKR

タカラバイオ(株)
SP6 RNA Polymerase
修飾酵素
15,000 U ¥79,000
¥63,200
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
2520B(A×5)
※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。
カートにいれる

WEB会員ログインが必要です

製品説明

本酵素は、SP6プロモーター配列を含む二本鎖DNAを鋳型、NTPを基質として、プロモーター下流の鋳型DNAに相補的な一本鎖RNAを合成する酵素である。SP6プロモーター配列に高い特異性を示し、他の生物由来のプロモーターを認識しない。

保存

-20℃

濃度

10~50 U/μl

形状

10 mMリン酸カリウム緩衝液(pH7.9)
1 mMDTT
0.1 mMEDTA
150 mMNaCl
50%グリセロール

添付Buffer組成(10×)

400 mMTris-HCl(pH7.5)
60 mMMgCl2
20 mMスペルミジン
100 mMDTT[別添付]
0.1%BSA[別添付]

活性の定義

37℃、pH7.5において、1時間に1 nmolの[3H]GMPを酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

40 mMTris-HCl(pH7.5)
6 mM MgCl2
10 mMDTT
2 mMスペルミジン
各0.5 mM ATP, UTP, CTP
0.5 mM[3H]GTP
0.01%BSA
1 μg/100 μlpSP65 DNA

品質管理データ

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis(CoA)をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

使用上の注意

  • 至適pHは7.5、Mg2+と還元剤を要求し、BSAおよびスペルミジンの添加により活性化される3)
  • 使用時は添付Bufferに必ずDTTとBSAを添加すること。これらを含まない場合、活性が現れないことがある。
  • 最適温度は40℃(37℃の約130%)で、酵素量は300 U/mlまで、template量は100 μg/mlまで合成量に正の相関を示す3)。反応時間が1時間を超える場合には、37℃の方がよい。
  • 特定領域だけの効率のよい転写のためには、その領域下流で鋳型DNAを平滑型、または5'突出型にカットしておく方が望ましい4)

用途

  • 高標識RNAプローブの作製3)
  • RNA splicing反応の前駆体の作製5)
  • Cap analogをprimerに用いた、capped mRNAの作製6)

起源

Escherichia coli carrying the plasmid containing phage SP6 RNA polymerase gene1)

一般的性質

  • 分子量
    約96,000
  • サブユニット
    一本鎖単純ポリペプチド
  • 至適pH
    pH7.5
  • 補因子
    Mg2+(至適濃度:6 mM)
    還元剤(10 mM DTT、または20 mM 2-メルカプトエタノール)
  • 活性化剤
    2 mMスペルミジン(4 mMではDNAと共沈)
  • 阻害剤
    NEM(10 -4M)、pCMB(5 × 10 -8M)で失活

相対活性

反応温度と相対活性(37℃を100%としたとき)

反応温度(℃) 20 25 37 40 45
相対活性(%) - 10 100 130 80

pHと相対活性

pH 7.5 7.7 7.8 8.0
相対活性(%) 100 75 33 4

注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
  • タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
    また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。
  • ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。