タンパク質／ウイルスベクター精製などでの核酸除去に
- 細胞粗抽出液に含まれる多様なDNAおよびRNAを分解
- 試料の粘性を低減し、精製タンパク質の回収率を向上
製品説明
NucleoGone Endonucleaseは、DNAおよびRNA（一本鎖、二本鎖、直鎖状、および環状形態）を効率的に分解する酵素であり、幅広い条件下で作用します。宿主細胞からのタンパク質精製やウイルスベクター精製などの工程において、混在する核酸の分解・除去に有用です。
図1．様々な種類の核酸分解能（他社比較）
λDNA、λDNA-Hind III digest、pUC19、Linearized pUC19、9 kb PCR product、1.7 kb RNAの核酸に対し、NucleoGone Endonucleaseと他社酵素それぞれを用いて消化し、アガロースゲル電気泳動を行った。その結果、NucleoGone Endonucleaseは他社酵素と比べて同等またはそれ以上の核酸分解能を示した。
M1：DL2,000 DNA Marker（100、250、500、750、1,000、2,000 bp）
M2：λDNA-Hind III digest Marker
（125、564、2,027、2,322、4,361、6,557、9,416、23,130 bp）
A：酵素なし
B：NucleoGone Endonuclease (1 U)
C：A社酵素（1 U）
M2：λDNA-Hind III digest Marker
（125、564、2,027、2,322、4,361、6,557、9,416、23,130 bp）
A：酵素なし
B：NucleoGone Endonuclease (1 U)
C：A社酵素（1 U）
1：λDNA
2：λDNA-Hind III digest
3：pUC19
4：Linearized pUC19
5：9 kb PCR product
6：1.7 kb RNA
2：λDNA-Hind III digest
3：pUC19
4：Linearized pUC19
5：9 kb PCR product
6：1.7 kb RNA
λDNA、λDNA-Hind III digest、pUC19、Linearized pUC19、9 kb PCR product、1.7 kb RNAの核酸に対し、NucleoGone Endonucleaseと他社酵素それぞれを用いて消化し、アガロースゲル電気泳動を行った。その結果、NucleoGone Endonucleaseは他社酵素と比べて同等またはそれ以上の核酸分解能を示した。
内容
NucleoGone Endonuclease 25,000 U
保存
－20℃
濃度
100 U/μl
起源
Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the gene for NucleoGone Endonuclease
一般的性質
分子量：約27 kDa
活性の定義
活性化サケ精子DNAを基質として、37℃において反応液の260 nmの吸光度を30分間に1.0増加させる酵素活性を1 Uとする。
活性測定用反応液組成
| 50 mM | Tris-HCl(pH8.0) | |
| 1 mM | MgCl2 | |
| 0.01％ | BSA | |
| 0.5 mg/ml | 活性化サケ精子DNA |
品質管理データ
性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。
用途
- ウイルス（例：AAV）精製工程における宿主細胞由来のゲノムDNAの除去
- タンパク質精製工程における細胞溶解液の粘度の低減
最適条件、阻害条件、失活条件
- 本製品は、以下の条件で活性を保持することを確認済みです。
条件 最適条件 反応条件 温度 37～42℃ 4～42℃ pH 8～10 7～10 Na＋、K＋ 0～100 mM 0～300 mM Mg2＋ ≧1 mM ≧0.01 mM DTT 0～50 mM ≧0 mM 2-mercaptoethanol 0～200 mM ≧0 mM Sodium deoxycholate 0～0.1％ 0～1％ Triton X-100 0～1％ 0～1％ - 活性は2 mM以上のEDTAで完全に阻害されます。
- 本酵素を完全失活させる場合は、100 mMになるようにNaOHを添加し、70℃で30分間加熱してください。
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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