比色法による骨代謝マーカー酵素の簡易検出に
製品説明
本製品は、基質pNPP（p-nitro-phenyl phosphate）を用いて、酸性ホスファターゼ（ACP）およびアルカリ性ホスファターゼ（ALP）の活性をそれぞれ検出するキットである。酸性ホスファターゼ検出系に酒石酸を加えることで、破骨細胞の酵素マーカーの1つである酒石酸耐性酸性ホスファターゼ（TRACP）の活性も検出できる。骨芽細胞の酵素マーカーの1つであるアルカリ性ホスファターゼと共に、骨代謝に関わる2つの酵素を同時に検出することが可能である。
内容
| 1. | pNPP (p-nitro-phenyl phosphate) substrate | 24 mg×5 |
| 2. | 細胞抽出用溶液 | 11 ml×2 |
| 3. | 酒石酸溶液 | 4 ml |
| 4. | 酸性ホスファターゼ用緩衝液 | 30 ml |
| 5. | アルカリ性ホスファターゼ用緩衝液 | 30 ml |
| 6. | 96ウェルプレート | 1枚 |
保存
4℃
操作法の概略
細胞の洗浄
↓
細胞の可溶化
↓
使用緩衝液の選択
↓
酵素反応 37℃、 15-60分
↓
エンドポイントアッセイ：反応停止（呈色）
キネティックアッセイ：ALPの場合のみ可能
↓
405 nmの吸光度測定
↓
細胞の可溶化
↓
使用緩衝液の選択
↓
酵素反応 37℃、 15-60分
↓
エンドポイントアッセイ：反応停止（呈色）
キネティックアッセイ：ALPの場合のみ可能
↓
405 nmの吸光度測定
Protocols
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