哺乳動物細胞用エレクトロポレーション試薬
- 遺伝子導入困難な細胞への高効率なエレクトロポレーションを実現
- キュベット式エレクトロポレーター装置のほとんどに適合
- 低コストで高い導入効率
- 高い細胞生存率
- RNP導入によるゲノム編集実験にも使用可能
製品説明
Ingenio Electroporation Kitは、核酸導入が困難な哺乳動物細胞、特にプライマリー細胞に対して、低コストでありながらも高い核酸導入効率と低毒性を実現する独自のエレクトロポレーション用試薬、キュベット、Cell Droppersで構成されるキットである。Bio-Rad社（Gene Pulser Xcell Electroporator）, Lonza社（amaxa Nucleofactor II/2b）, BTX社, などが販売するキュベット式エレクトロポレーション装置に適合するので専用装置を新規導入する必要がない。Ingenio Kitのランニングコストは、amaxa Nucleofactor II/2b専用試薬キット（25回分）と比較した場合、25回用キット（MIR50112）では33％OFF相当*、50回用キット（MIR50115）では47％OFF相当*、100回用キット（MIR50118）では51％OFF相当*の低ランニングコストとなり、圧倒的なコストパフォーマンスを示す。Ingenio 0.2 cmキュベットはamaxa Nucleofactor II/2bに適合し、Ingenio 0.4 cmキュベットはBio-Rad Gene Pulser Xcell Electroporatorに適合する。
* amaxa専用試薬キット25回用（2015年2月23日時点での当社調査価格￥60,000）とのコスト比較算出値
図1. ヒトiPS細胞への高効率エレクトロポレーション
2×106個のiPS細胞を用いてIngenio Electroporation KitとAmaxa Nucleofector II装置によりプラスミドDNAの導入を行った。
8 μg ZsGreen発現プラスミド（Clontech）を導入した後、0.33×106細胞／wellとなるように6ウェルプレートへ播種した。
24時間後に位相差（A）と蛍光（B）顕微鏡観察を行った。さらにフローサイトメーター解析（C）も同時に行った（黒ライン：非導入細胞、緑ライン：トランスフェクション細胞。
85.38％の細胞でZsGreenの発現が確認できた。
★ヒトiPS細胞へのエレクトロポレーション実験のプロトコール（PDF）は こちら
図2. Amaxa Nucleofector II装置の使用による各細胞へのプラスミドDNA導入効率
プラスミド導入の24時間後にフローサイトメーターにより測定された。
図3. Gene Pulser Xcell Eukaryotic Systemの使用による各細胞へのプラスミドDNA導入効率
プラスミド導入の24時間後にフローサイトメーターにより測定された。
* amaxa専用試薬キット25回用（2015年2月23日時点での当社調査価格￥60,000）とのコスト比較算出値
図1. ヒトiPS細胞への高効率エレクトロポレーション
2×106個のiPS細胞を用いてIngenio Electroporation KitとAmaxa Nucleofector II装置によりプラスミドDNAの導入を行った。
8 μg ZsGreen発現プラスミド（Clontech）を導入した後、0.33×106細胞／wellとなるように6ウェルプレートへ播種した。
24時間後に位相差（A）と蛍光（B）顕微鏡観察を行った。さらにフローサイトメーター解析（C）も同時に行った（黒ライン：非導入細胞、緑ライン：トランスフェクション細胞。
85.38％の細胞でZsGreenの発現が確認できた。
★ヒトiPS細胞へのエレクトロポレーション実験のプロトコール（PDF）は こちら
図2. Amaxa Nucleofector II装置の使用による各細胞へのプラスミドDNA導入効率
プラスミド導入の24時間後にフローサイトメーターにより測定された。
図3. Gene Pulser Xcell Eukaryotic Systemの使用による各細胞へのプラスミドDNA導入効率
プラスミド導入の24時間後にフローサイトメーターにより測定された。
Ingenio Electroporation Solutionを用いたCas9とgRNA複合体（RNP）の効率的なゲノム編集実験
Ingenio Electroporation SolutionとGene Pulser Xcell Eukaryotic System（Bio-Rad社）を用いて、K562またはJurkat細胞に750 nM Cas9と1,500 μM gRNAより作製されたCas9/gRNA RNP複合体をエレクトロポレーションし、（A）PPIBまたは（B）WTAPをターゲットとするゲノム編集を行った。
エレクトロポレーション48時間後に、T7E1アッセイを行い、切断効率の割合を算出した。NSPは非特異的なバンド。
パルス条件：
Voltage （V） | Capacitance | Cuvette Size （cm） | Electroporation Volume （μl） | ||
（A） | K562 | 150 | 950 μF | 0.2 | 100 |
Jurkat | 130 | ||||
（B） | K562 | 150 | |||
Jurkat | 150 | ||||
内容
Ingenio Electroporation Kits
Ingenio Electroporation Solution
製品コード |
キットコンポーネント名称 |
適合機種 |
||
Ingenio Solution |
Cuvettes |
Cell Droppers |
||
MIR50112 |
6.25 ml |
0.2 cmキュベット×25個 |
25個 |
Lonza-amaxa Nucleofactor II/2b |
MIR50115 |
12.5 ml |
0.2 cmキュベット×50個 |
50個 |
|
MIR50118 |
12.5 ml×2 |
0.2 cmキュベット×100個 |
100個 |
|
MIR50113 |
6.25 ml |
0.4 cmキュベット×25個 |
25個 |
Bio-Rad Gene Pulser, Harvard-BTX |
MIR50116 |
12.5 ml |
0.4 cmキュベット×50個 |
50個 |
|
MIR50119 |
12.5 ml×2 |
0.4 cmキュベット×100個 |
100個 |
|
Ingenio Electroporation Solution
製品コード |
Ingenio Solution |
MIR50111 |
6.25 ml |
MIR50114 |
12.5 ml |
MIR50117 |
12.5 ml×2 |
保存
Ingenio Solution：4℃
Ingenio Cuvettes：室温
Ingenio Cell Droppers：室温
※キットの輸送温度は4℃です。
Ingenio Cuvettes：室温
Ingenio Cell Droppers：室温
※キットの輸送温度は4℃です。
IngenioはMirus Bio社のトレードマークです。
Gene Pulser Xcell はBio-Rad社のトレードマークです。
Amaxa, NucleofectorはLonza社又はその系列会社の登録商標です。
Gene Pulser Xcell はBio-Rad社のトレードマークです。
Amaxa, NucleofectorはLonza社又はその系列会社の登録商標です。
トランスフェクション試薬選択 オンラインツール
◆選択ガイド
実験目的別に、各標的細胞に最適な遺伝子導入試薬（Mirus社製品）をまとめました。
効率的な試薬の選択にご活用ください。
効率的な試薬の選択にご活用ください。
▶ 遺伝子導入試薬 選択ガイド（Mirus社）
◆検索ツール
“Reagent Agent”は、Mirus社が提供するトランスフェクション試薬の検索ツールです。
細胞と導入する核酸の種類から、推奨されるトランスフェクション試薬を検索することができます。
細胞と導入する核酸の種類から、推奨されるトランスフェクション試薬を検索することができます。
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- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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