Human Mitochondrial DNA (mtDNA) Monitoring Primer Setは、リアルタイムPCRを利用してヒトのミトコンドリアDNA(mtDNA)コピー数を核DNA(nDNA)を基準として相対的に測定するためのプライマーセットである。本製品にはmtDNAとnDNAを検出するためのプライマーペアがそれぞれ2種類、合計4種類含まれている。各プライマーはPseudogenes(偽遺伝子)を増幅しないように設計されている。また、マウス由来のDNAは増幅しないように設計されているので、iPS細胞のようにマウス由来のフィーダー細胞を用いる場合においても問題なく使用できる。
本製品では、1サンプルに対して4種類のプライマーペアを使用してリアルタイムPCRを行い、得られたmtDNAとnDNAのCt値の差より、mtDNAのコピー数を相対定量にて算出する。本製品を使用することにより、iPS細胞等の多能性細胞から肝細胞などへの分化・誘導過程で変動するmtDNAコピー数を簡単にモニタリングできる。
本製品に含まれる各プライマーペアは、MightyAmp for Real Time (TB Green Plus)(製品コード R075A/B)およびTB Green
Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)(製品コード RR820S/A/B)で良好に反応することを確認している。
解析には、Microsoft Office Excelで作成されたmtDNAコピー数算出用のファイルが利用できます。以下からダウンロードしてご利用ください。
mtDNA_Copy_Number_Calculation(ZIP 9.0 K)