蛍光タンパク質搭載レンチウイルスベクター

Lenti-X Living Colors Vectorを用いることで、目的タンパク質を蛍光タンパク質と融合して発現するレンチウイルスを作製でき、神経細胞（図1）や幹細胞、非分裂細胞を含むほとんどの細胞に遺伝子導入が可能である。本ベクターには単量体の蛍光タンパク質（AcGFP1あるいはDsRed-Monomer）を採用しているので目的タンパク質の機能を損なうことなく融合タンパク質を生成でき、目的遺伝子の発現モニタリング、パッケージング細胞への形質転換および標的細胞への感染のマーカー、細胞内での局在化や挙動の可視化のために理想的なツールとなる。AcGFP1やDsRed-Monomerは融合タグとしてさまざまなタンパク質とともに用いられ、タンパク質機能や細胞内局在化の解明に役立っている。両者は哺乳類細胞内で非常に安定であり、安定発現株の構築にも有用である。
また、融合発現ではなく、IRESを利用し目的遺伝子とZsGreen1をバイシストロニックに発現するベクターも選択できる。
すべてのLiving Colors蛍光タンパク質と同様、いずれも検出に補因子や基質の添加は不要であり、細胞が生きたままの状態でリアルタイムに観察が可能である。

図1. ヒト神経前駆細胞へのDsRed-Monomer-NucおよびAcGFP-Actin発現レンチウイルスの等量（MOI）での共感染例
神経球をラミニン上で分化させ、DsRed-MonomerおよびAcGFP1を発現するレンチウイルスを感染させた。アクチンとAcGFP1の融合タンパク質は細胞骨格をはっきりと可視化させている。またDsRed-Monomerの核への局在が、それぞれの細胞の位置を明確に示している。
MOI=multiplicity of infection

図2. DsRed-MonomerとAcGFP1の励起および蛍光スペクトル

ご注意：拡散防止措置に関する確認書が必要な製品です。
Lenti-XシリーズのレンチウイルスベクターはプロウイルスにおいてLTRのプロモーター活性を持つため、これらのベクターを用いた遺伝子組換え実験は、遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物多様性の確保に関する法律第13条に基づき、文部科学大臣による拡散防止措置の確認が必要です。
なお、これらの製品のご購入に際しては、これらのベクターを使用するにあたり文部科学大臣による拡散防止措置の確認を受けていることをご提示いただく確認書「Lenti-Xシリーズレンチウイルスベクター　拡散防止措置に関する確認書」の添付が必要です。

－20℃