※ 本製品は遺伝子組換え実験で細胞に導入した大腸菌由来のBeta-Galactosidaseの活性を染色するためのキットです。
細胞老化マーカーのSA-β-Gal 染色を目的をした製品ではありませんので、ご注意ください。
細胞老化マーカーのSA-β-Gal 染色を目的をした製品ではありませんので、ご注意ください。
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- 簡便、迅速なβ-ガラクトシダーゼ活性検出システム
- 発色法による顕微鏡観察、および化学発光法による定量的アッセイから選択可能
製品説明
β-ガラクトシダーゼはLacZ遺伝子がコードするタンパク質で、レポーターアッセイのマーカーとして、あるいは、トランスフェクション効率のモニタリングやプロモーター／エンハンサー研究などの用途に広く用いられている。クロンテックではβ-ガラクトシダーゼ活性を検出するためのキットとして、発色法と化学発光法の2種類の製品を用意している。
発色法
Beta-Galactosidase Staining Kitは、哺乳類細胞のβガラクトシダーゼ発現を発色法によって検出するためのキットである。細胞中に発現しているβ-ガラクトシダーゼによって基質となるX-galが加水分解されると青色の産物が生じる。キットには検出に必要な試薬が全て含まれており、細胞を固定・洗浄し、X-Gal Staining Mixを加えて加温するだけで、光学顕微鏡を用いた青色染色の観察が可能となる。
化学発光法
Luminescent β-Galactosidase Reporter System 3には、高感度な化学発光法によりβ-ガラクトシダーゼ活性を定量的に検出するための試薬と2種類のベクター＊1（pβgal-Basic Vector、pβgal-Control Vector）が含まれている。化学発光のシグナルは数時間にわたり安定的で、シンチレーションカウンター、チューブタイプ、またはプレートタイプのルミノメーター、X線フィルムへの露光などにより検出が可能である。本システムのベクターは、シス制御エレメントが遺伝子発現に与える影響を解析する際に柔軟に対応できるように設計されている。また、これらのベクターはトランスフェクション効率の標準化にも使用することができる。
表1. LacZベクター
図1. 化学発光アッセイの実験フロー
図2. pβgalベクターマップ
図3. pCMVβベクターマップ
| ＊1 | すでにベクターをお持ちの場合はLuminescent β-galactosidase Detection Kit IIをご利用ください。 |
表1. LacZベクター
| 製品名 | 製品コード | 備考 |
| pLacZ-Basic Vector＊2 (pβgal-Basic Vector) | 631707 | プロモーター／エンハンサー配列を含まず、評価対象のプロモーター／エンハンサー配列をクローニングして使用できる他、ネガティブコントロールとしても使用可能。 |
| pLacZ-Control Vector＊2 (pβgal-Control Vector) | 631709 | SV40プロモーターおよびエンハンサー配列を備えており、ポジティブコントロールとして使用可能。 |
| pCMV-LacZ Vector | 631719 | CMV IEプロモーターによりβ-ガラクトシダーゼを高発現するベクター。リファレンスベクターやコントロールベクターとして使用可能。 |
| ＊2 | pLacZ-Basic Vector 、pLacZ-Control Vector は、それぞれ、Luminescent β-Galactosidase Reporter System 3（製品コード 631713）に含まれるpβgal-Basic Vector、pβgal-Control Vectorと同じベクターです。 |
図1. 化学発光アッセイの実験フロー
図2. pβgalベクターマップ
図3. pCMVβベクターマップ
内容
Beta-Galactosidase Staining Kit（製品コード 631780）
Luminescent β-galactosidase Reporter System 3（製品コード 631713）＊3
Luminescent β-galactosidase Detection Kit II（製品コード 631712）＊3
 |
・X-Gal Solution (20 mg/ml) ・Staining Solution 1 ・Staining Solution 2 ・Staining Solution 3 ・10X PBS ・10X Fixing Buffer |
Luminescent β-galactosidase Reporter System 3（製品コード 631713）＊3
・pβgal-Basic Vector (500 ng/μl)
・pβgal-Control Vector (500 ng/μl)
・Positive Control β-galactosidase
・Reaction Buffer
・Reaction Substrate
・pβgal-Control Vector (500 ng/μl)
・Positive Control β-galactosidase
・Reaction Buffer
・Reaction Substrate
Luminescent β-galactosidase Detection Kit II（製品コード 631712）＊3
・Positive Control β-galactosidase
・Reaction Buffer
・Reaction Substrate
・Reaction Buffer
・Reaction Substrate
| ＊3 | Luminescent β-galactosidase Reporter System 3、Luminescent β-galactosidase Detection Kit IIには細胞溶解液、酵素希釈液は含まれておりません。 |
保存
Beta-Galactosidase Staining Kit（製品コード 631780）
10X PBS：室温
その他のコンポーネント：－20℃
Luminescent β-galactosidase Reporter System 3（製品コード 631713）
pβgal-Basic Vector、pβgal-Control Vector、Positive Control β-galactosidase：－20℃
その他のコンポーネント：4℃（凍結不可）
Luminescent β-galactosidase Detection Kit II（製品コード 631712）
Positive Control β-galactosidase：－20℃
Reaction Buffer、Reaction Substrate：4℃（凍結不可）
10X PBS：室温
その他のコンポーネント：－20℃
Luminescent β-galactosidase Reporter System 3（製品コード 631713）
pβgal-Basic Vector、pβgal-Control Vector、Positive Control β-galactosidase：－20℃
その他のコンポーネント：4℃（凍結不可）
Luminescent β-galactosidase Detection Kit II（製品コード 631712）
Positive Control β-galactosidase：－20℃
Reaction Buffer、Reaction Substrate：4℃（凍結不可）
用途
・レポーター遺伝子アッセイ
・トランスフェクション効率のモニタリングやトランスフェクションの標準化
・プロモーター/エンハンサー研究
・トランスフェクション効率のモニタリングやトランスフェクションの標準化
・プロモーター/エンハンサー研究
- 注意事項
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