Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation)

Yeast Processing Reagent（for total RNA preparation）は、RNAiso Plus（製品コード 9108/9109）やNucleoSpin RNA（製品コード 740955.10/.50/.250）を用いて酵母から高純度のtotal RNAを精製する際に併用する前処理試薬である。本製品を用いた酵母菌体の前処理操作は、遠心による酵母菌体の洗浄と回収、Yeast Processing Enzyme Solution（細胞壁分解酵素）とYeast Processing Bufferによる酵母細胞壁の分解からなる。本製品では細胞壁分解酵素を利用して前処理を行うため、ガラスビーズや液体窒素を利用した煩雑な操作は不要である。
本製品で前処理を行うことで、主な酵母（Saccharomyces, Candida, Pichia等）から、RNA関連の一般的な各種遺伝子工学実験（RT-PCR等）に使用可能な高純度のtotal RNAを精製することができる。標準的な実験例の場合、2～5×10⁷の対数増殖期の新鮮なSaccharomyces cerevisiae酵母菌体から10～20 µgの高純度total RNAが得られる。本製品は長時間培養した酵母菌体や、凍結酵母菌体からのtotal RNA調製にも利用することができる。また、対数増殖期にある新鮮な酵母菌体からは、通常より反応時間を短縮してtotal RNAを精製可能である。

RNA抽出試薬について
本製品はRNAiso PlusまたはNucleoSpin RNAと組み合わせてご使用ください。
他のRNA抽出試薬との組み合わせについては、適合性を確認していません。

・Yeast Processing Buffer
・Yeast Processing Enzyme Solution^*1
・RNase-free DNase I^*2
・10×DNase I Buffer^*2

*1 細胞壁分解酵素を含む。
*2 RNAiso Plusでのtotal RNA調製時に必要に応じて使用する。

－20℃

• RNAiso Plus（製品コード 9108/9109）またはNucleoSpin RNA（製品コード 740955.10/50/250）
• 遠心分離機
• 特級エタノール（＞99％）
• 氷冷滅菌精製水
• 各種チューブ
• 恒温槽（30℃、37℃ インキュベート用）
• RNase-free水
• 1 M DTT溶液または2-メルカプトエタノール（2-ME）^*1
  （2-MEは毒物ですので、取扱い・廃棄には注意してください。）
• クロロホルム^*2
• イソプロパノール^*2
• 75％エタノール［RNase-free水を用いて調製］^*2

*1 NucleoSpin RNAでのtotal RNA調製時に使用する。
*2 RNAiso Plusでのtotal RNA調製時に使用する。