One Step TB Green® PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)

増幅効率重視の1 step RT-qPCR試薬
  • バッファー系を1ステップリアルタイムRT-PCR用に至適化
  • 増幅効率がよく高感度
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
RR066A

TKR

タカラバイオ(株)
One Step TB Green® PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
リアルタイムPCR(qPCR)関連試薬
100回(50 μl反応系) ¥51,000
¥40,800
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
RR066A
RR066B(A×5)

TKR

タカラバイオ(株)
One Step TB Green® PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
リアルタイムPCR(qPCR)関連試薬
500回(50 μl反応系) ¥198,000
¥158,400
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
RR066B(A×5)
※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。
逆転写酵素PrimeScriptシリーズのご紹介
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製品説明

本製品は、インターカレーター法による1ステップリアルタイムRT-PCR専用のキットである。RT-PCRを1チューブ内で連続的に行えるため、操作が簡便でコンタミネーションの心配がない。また、増幅産物をリアルタイムで検出でき、PCR後に電気泳動などで確認する必要がない。RNAウイルスなど微量RNAの検出に最適である。コンポーネントがプレミックス化され、反応液の調製も簡便である。
反応には伸長性に優れ、短時間の反応で効率よくcDNA合成が可能なPrimeScript RTaseとPCR酵素として定評のあるTaKaRa Ex Taq HSを用い、反応系を1ステップRT-PCR用に至適化しているので、低濃度の鋳型でも高感度な検出が可能である。反応特異性も向上しており、高い定量性が得られる。

本製品の適応機種
本製品は、以下の各種リアルタイムPCR装置で良好に反応できることを確認している。
技術情報のProtocolsや説明書を参照してください。
  • Thermal Cycler Dice Real Time System III(製品コード TP950/TP970/TP980/TP990)
  • Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960:終売)
  • Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760:終売)
  • CronoSTAR 96 Real-Time PCR System(製品コード 640231/640232)
  • CronoSTAR Portable Real-Time PCR System(製品コード 640245/640247/640249)
  • Appied Biosystems 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR System
    StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
  • LightCycler(Roche Diagnostics社)
  • Smart Cycler System/Smart Cycler II System(Cepheid社)など

プローブを用いる1ステップリアルタイムRT-PCRには、One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(製品コード RR064A)を使用してください。

内容

(100回分;50 μl反応系)
2×One Step TB Green RT-PCR Buffer III *1840 μl×3
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl)100 μl
PrimeScript RT enzyme Mix II *2 100 μl
RNase Free dH2O1.25 ml×2
ROX Reference Dye (50×conc.) *3100 μl
ROX Reference Dye II (50×conc.) *3100 μl

*1 dNTP Mixture、Mg2+、およびTB Greenを含む。

*2 RNase Inhibitorを含む。

*3 Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用する。
◆ROX Reference Dyeを添加する機種
 ・Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
 ・StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
◆ROX Reference Dye IIを添加する機種
 ・Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
◆添加の必要がない機種
 ・Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ(製品コード (製品コード TP950/TP970/TP980/TP990、TP900/TP960/TP700/TP760:終売)など)
 ・CronoSTAR 96 Real-Time PCR System(製品コード 640231/640232)
 ・CronoSTAR Portable Real-Time PCR System(製品コード 640245/640247/640249)
 ・LightCycler(Roche Diagnostics社)
 ・Smart Cycler System/Smart Cycler II System(Cepheid社)

保存

-20℃
2×One Step TB Green RT-PCR Buffer III は、遮光して-20℃にて保存すること。

キット以外に必要な試薬、機器(主なもの)

  • リアルタイムPCR装置(authorized instruments)
  • 専用反応チューブあるいはプレート
  • PCR用プライマー*1
  • マイクロピペットおよびチップ(オートクレーブ処理したもの)

    *1 PCR用プライマーの設計方法は、「プライマー設計について」をご参照ください。

使用上の注意

本キットによる逆転写反応には、PCR用のSpecific Primer (Reverse) を用いる。Random PrimerやOligo dT Primerは使用できない。

特長

  • 1ステップリアルタイム RT-PCRにより、RNAウイルスなど微量RNAの解析を迅速かつ正確に行うことができる。
  • PCRには、Hot Start PCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用いている。バッファー系は、リアルタイムPCR用に至適化されているため、増幅効率が良く、高感度な検出が可能である。また、バッファーは、TB Greenをあらかじめ含む2×濃度のプレミックスなので、反応液の調製が簡単である。

リアルタイムRT-PCR用プライマーを作製します「Perfect Real Timeサポートシステム」

Perfect Real Timeサポートシステム for インターカレーターは、インターカレーター法(TB Green検出)によるリアルタイムRT-PCR用に最適化されたプライマーを検索・オンライン注文するためのシステムです。
ヒト、マウス、ラット、ウシ、イヌ、ニワトリ、イネ、シロイヌナズナのRefSeq登録遺伝子またはEnsembl Plants登録遺伝子に対して網羅的にリアルタイムRT-PCR用のプライマーを設計しています。
ターゲット遺伝子を検索し、ご希望のプライマーセットを選択すれば簡単にオンラインで注文できます。
わずらわしいプライマー設計と反応条件の至適化作業はもう不要です。siRNAの効果の確認、DNAマイクロアレイ解析結果の検証など遺伝子発現定量や遺伝子検出にどうぞお気軽にご利用ください。
  サポートシステムはこちら

* プライマーによっては1ステップの系では十分に性能を発揮できない場合がありますが、その場合にはTB Green Premix Ex Taq II(Tli RNaseH Plus)(製品コード RR820S/A/B)または TB Green Premix Ex Taq(Tli RNaseH Plus)(製品コード RR420S/A/B)等を用いる2ステップRT-PCRでお試しください。
One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(製品コード RR086A)、またはOne Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(製品コード RR096A)を用いることで改善する場合もあります。
リアルタイムPCR関連実験の各種手法をホームページでご紹介しています。あわせてご参照ください。
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注意事項
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