- PCR法でゲノムDNAを迅速にウォーキング
- エキソン-イントロン接合部やプロモーター、その他あらゆる調節因子のクローニングに理想的
- 未知の配列をすばやく決定
GenomeWalker KitsはPCR法に基づくシンプルな方法により、EST（expression sequence tag, 発現配列タグ）などの既知配列からスタートして、ゲノムDNAの上流または下流へウォーキングを行える。GenomeWalkerでは長距離PCRを用いるため、各ウォーキングで最高6 kbまでのゲノムDNAが得られる（図1）。得られた配列から新たなプライマーを作製してウォーキングを繰り返すだけで、簡単にウォーキング範囲を広げることができる。
GenomeWalker Universal GenomeWalker2.0
本製品はあらゆる生物種のゲノムからGenomeWalker用ライブラリーを構築するためのキットである。Universal GenomeWalker2.0（製品コード 636405）は従来製品のGenomeWalker Universal Kit（製品コード 638904；終売）に、高純度ゲノムDNA抽出キットNucleoSpin tissue（製品コード 740952.10）.、制限酵素による消化後のDNA断片の精製用スピンカラムNucleoSpin Gel and PCR Clean-Up（製品コード 740609.50）およびPCR酵素Advantage 2 PCR Kit （製品コード 639207）をセットした便利なキットである。Universal GenomeWalker 2.0は遺伝子特異的プライマーを別途用意するだけで、ライブラリー構築3回と80 walkの反応を行うことができる。
図1. GenomeWalker法
本製品はあらゆる生物種のゲノムからGenomeWalker用ライブラリーを構築するためのキットである。Universal GenomeWalker2.0（製品コード 636405）は従来製品のGenomeWalker Universal Kit（製品コード 638904；終売）に、高純度ゲノムDNA抽出キットNucleoSpin tissue（製品コード 740952.10）.、制限酵素による消化後のDNA断片の精製用スピンカラムNucleoSpin Gel and PCR Clean-Up（製品コード 740609.50）およびPCR酵素Advantage 2 PCR Kit （製品コード 639207）をセットした便利なキットである。Universal GenomeWalker 2.0は遺伝子特異的プライマーを別途用意するだけで、ライブラリー構築3回と80 walkの反応を行うことができる。
図1. GenomeWalker法
用途
- Genomic DNA walking
- プロモーターや調節領域の同定
- エキソンジャンクションのマッピング
- トランスポゾンやウイルスの挿入位置同定
- Zinc finger nucleaseやTAL effector nucleaseなどによるゲノムDNA改変の確認
- ゲノムDNAのクローニング
- 次世代シーケンサーによるマッピング
内容
Universal GenomeWalker 2.0（製品コード 636405）
・Four Restriction Enzymes (Dra I, EcoR V, Pvu II ＆ Stu I)
・Corresponding Restriction Enzyme Buffers
・Positive Control Human GenomeWalker Library
・Adaptor Primer 1 (AP1)
・Nested Adaptor Primer 2 (AP2)
・GenomeWalker Adaptor
・Positive Control tPA Primer 1 (PCP1)
・Positive Control tPA Nested Primer 2 (PCP2)
・T4 DNA Ligase
・Ligation Buffer
・Positive Control Human Genomic DNA
・NucleoSpin Tissue（製品コード 740952.10）
・NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up（製品コード 740609.50）
・Advantage 2 PCR Kit（製品コード 639207）
・Four Restriction Enzymes (Dra I, EcoR V, Pvu II ＆ Stu I)
・Corresponding Restriction Enzyme Buffers
・Positive Control Human GenomeWalker Library
・Adaptor Primer 1 (AP1)
・Nested Adaptor Primer 2 (AP2)
・GenomeWalker Adaptor
・Positive Control tPA Primer 1 (PCP1)
・Positive Control tPA Nested Primer 2 (PCP2)
・T4 DNA Ligase
・Ligation Buffer
・Positive Control Human Genomic DNA
・NucleoSpin Tissue（製品コード 740952.10）
・NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up（製品コード 740609.50）
・Advantage 2 PCR Kit（製品コード 639207）
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