NucleoSpin^® RNA Plus

NucleoSpin RNA Plusは、迅速に効率良くゲノムDNAを除去できるNucleoSpin gDNA Removal Columnを採用した新世代のtotal RNA精製キットである。このキットではDNaseによる酵素処理の代わりに、NucleoSpin gDNA Removal Columnによる混入DNA除去を行うため、各種細胞、組織から20分という短時間でDNAを除去されたtotal RNAが精製できる。
試料とする細胞や組織を2-MEやTCEPの添加不要な新規Lysis Bufferを用いて溶解し、NucleoSpin gDNA Removal Columnによりライセートの清澄化とゲノムDNAの除去を行い、NucleoSpin RNA Plus Columnによりtotal RNAの精製を行う。

原理	シリカメンブレン法（2カラム）
形状	ミニスピンカラム
サンプル量	培養細胞： ～1×107 cells バクテリア： ～109 cells 酵母： ～108 cells 動物組織： ～30 mg
精製サイズ	＞200 bases
回収量	40～60 μg（HeLa細胞、5×106 cells） 80～100 μg（マウス肝臓、20 mg） 40～70 μg（マウス腎臓、20 mg） 30～60 μg（マウス脾臓、5 mg）
A260/280	1.9～2.1
A260/230	1.8～2.5
標準的RIN＊	＞9
溶出液量	30～120 μl
精製時間	20分
結合容量	200 μg

* RNA integrity number


図1. gDNA Removal Columnによる効率的なゲノムDNA除去
NucleoSpin RNA Plus（青）と他社製品（赤）を使用して5×10⁶個のHeLa細胞、20 mgマウス腎臓からtotal RNAを精製した。精製溶液中の残存ゲノムDNA量をqPCR法により測定した結果、NucleoSpin RNA Plusを用いて得られたRNA溶液ではより高いCt値を示し、より効率良くゲノムDNAが除去されることが示された。

・Lysis Buffer LBP
・Binding Solution BS
・Wash Buffer WB1
・Wash Buffer WB2 (Concentrate)
・RNase-free H₂O
・NucleoSpin gDNA Removal Column（黄リング）
・NucleoSpin RNA Plus Column（青リング、Collection Tubes付）
・Collection Tubes (2 ml)
・Collection Tubes (1.5 ml)

室温

試薬
・96～100％エタノール

器具
・1.5 mlマイクロチューブ
・ピペットチップ（滅菌済）
・ピペット
・高速遠心器
・サンプル破砕用ホモジェナイザー

NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。