製品説明
本製品は、One Step RT-qPCR法により新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)を検出するためのキットである。製品化にあたり、群馬パース大学大学院 木村博一教授に監修していただいた。
<ご案内> 2020年10月27日に取扱説明書を更新しましたので、ご使用時にはご確認くださいますようお願いします。
【本製品のプライマー・プローブ配列について】
アメリカ疾病予防管理センター(CDC)発行「2019-Novel Coronavirus (2019-nCoV) Real-time rRT-PCR Panel Primers and Probes」(Effective:
24 Jan 2020) に記載されたプライマー・プローブ配列を採用している。
遺伝子領域 | プライマー・プローブ名 | プライマー・プローブ配列(5’→3’) |
N1 | 2019-nCoV_N1-F | GACCCCAAAATCAGCGAAAT |
2019-nCoV_N1-R | TCTGGTTACTGCCAGTTGAATCTG |
2019-nCoV_N1-P | ACCCCGCATTACGTTTGGTGGACC |
N2 | 2019-nCoV_N2-F | TTACAAACATTGGCCGCAAA |
2019-nCoV_N2-R | GCGCGACATTCCGAAGAA |
2019-nCoV_N2-P | ACAATTTGCCCCCAGCGCTTCAG |
* N1、N2ともプローブの蛍光標識は、Cyanine5/ダーククエンチャー
【特長】
- RNA精製は不要
サンプルと簡易抽出試薬Solution Aの混合液を熱処理するだけの簡単な前処理のみでRT-qPCRへのサンプルを調製可能
- ウイルスの2領域同時検出でより高感度かつ特異的に検出
2ヶ所の遺伝子領域をターゲットとして同時検出する。
- 鋳型持込量が多く高感度に検出
50 μl 反応系あたり、鋳型として初発サンプル8 μl相当を持ち込むため、RNA精製法と同等の高感度検出が可能
- 前処理から検出まで1時間以内、迅速に判定可能
大容量品(製品コード RC30JW 1,000反応分)Solution Aを増量しました(2倍)
前処理とRT-qPCR反応を単一の容器で行なう方法はもちろん、前処理とRT-qPCR反応を別々の容器で実施するプロトコールにも対応が可能となりました。
内容
製品コード RC300A(50 μl反応 100回分)
<Package 1>
RT-qPCR試薬
RT-qPCR Mix*1 | 2× | 625 μl×4本 |
Primer/Probe Mix (SARS-CoV-2)*2 | 10× | 500 μl |
RNase Free H2O | 1 ml×2本 |
ROX Reference Dye*3 | 50× | 100 μl |
ROX Reference Dye II*3 | 50× | 100 μl |
EASY Dilution (for Real Time PCR) | 1 ml×2本 |
<Package 2>
Positive Control
Positive Control RNA (US N1/N2)*4、*5 | 1×107 copies/μl | 20 μl |
*1 酵素、基質等を含む。
*2 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意すること。
*3 蛍光物質を含んでいるため、遮光に留意すること。
*4 RNAの分解を抑えるために、凍結融解の繰り返しを避け、-80℃で保管
*5 Takara SARS-CoV-2 Positive Control (RNA)(製品コード RC351A)のPositive Control RNA Mixも使用可能
製品コード RC30JW(50 μl反応 1,000回分)
<Package 1>
RT-qPCR試薬
RT-qPCR Mix*1 | 2× | 12.5 ml×2本 |
Primer/Probe Mix (SARS-CoV-2)*2 | 10× | 5 ml |
RNase Free H2O | 20 ml |
ROX Reference Dye*3 | 50× | 1 ml |
ROX Reference Dye II*3 | 50× | 1 ml |
EASY Dilution (for Real Time PCR) | 20 ml |
<Package 2>
Positive Control
Positive Control RNA (US N1/N2)*4 | 1×107 copies/μl | 40 μl×5本 |
*1 酵素、基質等を含む。
*2 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意すること。
*3 蛍光物質を含んでいるため、遮光に留意すること。
*4 RNAの分解を抑えるために、凍結融解の繰り返しを避け、-80℃で保管
保存
Package 1:-20℃
Package 2:-80℃
本製品以外に必要な器具、機器(主なもの)
- 【器具】
-
・マイクロピペット
・マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
・リアルタイムPCR用のチューブ 等 ⇒ 弊社装置で使用する場合のチューブ一覧はこちら
- 【機器】
-
リアルタイムPCR装置(Cy5を検出可能なもの)
Thermal Cycler Dice Real Time System III (Cy5) with PC(製品コード TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960:終売)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760:終売)
※TP900/TP960/TP700/TP760は、Cy5オプションフィルターの追加が必要である。
Filter Unit (Cy5) for Thermal Cycler Dice Real Time System(製品コード TP803:お問合せください)
Filter Unit (Cy5) for LED(製品コード TP703)
CronoSTAR 96 Real-Time PCR System シリーズ(製品コード 640231/640232)
CronoSTAR Portable Real-Time PCR Systemシリーズ(製品コード 640247/640249:終売)
CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad社)
CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad社)
LightCycler 96 System/LightCycler 480 System II(Roche Diagnostics社)
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96well, 0.2 mL block)(Thermo Fisher Scientific社)
※上記の機種につき、反応液量50 μlでのリアルタイムRT-PCRの反応性確認を行っている。
使用に際して
本製品を使用する際の注意事項です。使用前に必ずお読みください。
- 使用目的:
本キットは、研究用試薬です。
- 測定結果:
本製品は遺伝子検出であるため、不活化されたウイルスも検出されます。
また、Primer/Probeの配列内に遺伝子の変異や欠損/挿入が生じた際には、検出できない場合があります。
(反応結果により発生する問題に関して、タカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。)
- 廃棄:
試料は感染性を有するものとして、各施設の安全規定に従って廃棄してください。作業区域は常に清潔に保ち、検体または検査に用いた器具等は高圧蒸気滅菌器を用いて121℃で20分間以上加熱滅菌処理、または次亜塩素酸ナトリウム液で処理を行った上、各施設の感染性廃棄処理マニュアルに従って処理してください。試薬を廃棄する際は多量の水で流してください。
プラスチックなどの試薬容器ならびに器具は、廃棄物の処理および清掃に関する法律に従って処理してください。
補足資料など
【Quick Manual】
Thermal Cycler Dice Real Time SystemシリーズおよびCronoSTAR 96 Real-Time PCR Systemシリーズを使用の場合に便利な“Quick Manual”をご用意しています。
キットに添付の取扱説明書とあわせてご使用ください。