ノロウイルス検査キット Ver.2（食品環境検査）
TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit（製品コード RR250A/B）をリニューアルし、Positive Control DNAが別売りになりました。
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製品説明
ノロウイルス（NoV）は、急性胃腸炎の主要な原因ウイルスである。感染源は、感染者の排泄物（便あるいは吐物）やNoVを保有する二枚貝（カキなど）と推定されている。感染すると数日の潜伏期間後に、主に嘔吐、下痢、腹痛、発熱（37～38℃）などの症状が現れる。NoVは、構造的に表面をカップ状の窪みをもつタンパク質で覆われ、内部にプラス一本鎖RNAの遺伝子を有している。今のところ、組織培養法などを用いてのNoVの分離・検出が困難なため、逆転写PCR法やリアルタイムPCR法などによって、ウイルスの検査診断が行われている。Genogroup I～Vの5つの遺伝子群に分類され、ヒトはGenogroup I (GI)とII (GII)に感染することが示唆されている。
本製品は、厚生労働省 医薬食品局 食品安全部 監視安全課より通知された｢ノロウイルスの検出法について｣（平成15年11月5日付け食安監発第1105001号別添）（最終改正：平成25年10月22日付け食安監発1022第1号）（以下「通知」と記載する）と同じ塩基配列のGI検出用およびGII検出用プライマーならびにプローブを使用したリアルタイムPCR法によるNoV検出キットである。蛍光物質を使用してPCR増幅産物をリアルタイムで解析するリアルタイムPCR法は、簡便性、迅速性、反応特異性の高さから、近年、食品などのNoVの検出を含め、種々の病原体の検査診断法に用いられている。
※ 本製品の製品化にあたっては、群馬パース大学大学院 木村博一教授に監修いただきました。
本製品は、厚生労働省 医薬食品局 食品安全部 監視安全課より通知された｢ノロウイルスの検出法について｣（平成15年11月5日付け食安監発第1105001号別添）（最終改正：平成25年10月22日付け食安監発1022第1号）（以下「通知」と記載する）と同じ塩基配列のGI検出用およびGII検出用プライマーならびにプローブを使用したリアルタイムPCR法によるNoV検出キットである。蛍光物質を使用してPCR増幅産物をリアルタイムで解析するリアルタイムPCR法は、簡便性、迅速性、反応特異性の高さから、近年、食品などのNoVの検出を含め、種々の病原体の検査診断法に用いられている。
※ 本製品の製品化にあたっては、群馬パース大学大学院 木村博一教授に監修いただきました。
内容
RR265A（RT 50回分、GI 反応50回分＊1、GII 反応50回分＊1）
＊1 8段階濃度、n＝3で検量線の作成を行い、cDNAサンプル、陰性コントロールについてn＝2で検出を行う場合、本製品では12検体の測定が可能です。
＊2 逆転写反応用試薬です。
＊3 dNTP MixtureおよびMg2+ を含みます。
＊4 RNase Inhibitorを含みます。
＊5 TaKaRa Ex Taq HS、dNTP Mixture、Mg2+ を含みます。
＊6 通知と同じ塩基配列を採用しています。
＊7 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意してください。
＊8 Thermo Fisher Scientific社のリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用してください。
◆ ROX Reference Dyeを添加する機種
・ Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
◆ ROX Reference Dye IIを添加する機種
・ Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
・ QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96-well, 0.2 mL block)（Thermo Fisher Scientific社）
◆ 添加の必要がない機種
・ Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
・ CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
・ LightCycler 96 System（Roche Diagnostics社）
| 1．5 × PrimeScript Buffer (NV)＊2、3 | 200 μl |
| 2． PrimeScript RT Enzyme Mix (NV)＊2、4 | 50 μl |
| 3． Random 6 mers（100 μM）＊2 | 50 μl |
| 4． Premix Ex Taq (NV)（2× conc.）＊5 | 625 μl×2 |
| 5． GI Primer Mix＊6 | 50 μl |
| 6． GII Primer Mix＊6 | 50 μl |
| 7． GI Probe Mix＊6、7 | 50 μl |
| 8． GII Probe Mix＊6、7 | 50 μl |
| 9． ROX Reference Dye（50 × conc.）＊8 | 50 μl |
| 10． ROX Reference Dye II（50 × conc.）＊8 | 50 μl |
| 11． RNase Free H2O | 1 ml |
＊1 8段階濃度、n＝3で検量線の作成を行い、cDNAサンプル、陰性コントロールについてn＝2で検出を行う場合、本製品では12検体の測定が可能です。
＊2 逆転写反応用試薬です。
＊3 dNTP MixtureおよびMg2+ を含みます。
＊4 RNase Inhibitorを含みます。
＊5 TaKaRa Ex Taq HS、dNTP Mixture、Mg2+ を含みます。
＊6 通知と同じ塩基配列を採用しています。
＊7 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意してください。
＊8 Thermo Fisher Scientific社のリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用してください。
◆ ROX Reference Dyeを添加する機種
・ Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
◆ ROX Reference Dye IIを添加する機種
・ Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
・ QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96-well, 0.2 mL block)（Thermo Fisher Scientific社）
◆ 添加の必要がない機種
・ Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
・ CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
・ LightCycler 96 System（Roche Diagnostics社）
保存
－20℃
Premix Ex Taq (NV)（2×conc.）は、いったん融解したものは4℃保存し、6ヵ月を目途にご使用ください。長期保存の場合は、−20℃で凍結保存可能です。
Premix Ex Taq (NV)（2×conc.）は、いったん融解したものは4℃保存し、6ヵ月を目途にご使用ください。長期保存の場合は、−20℃で凍結保存可能です。
本製品以外に必要な機器、試薬（主なもの）
【試薬】
RNA抽出試薬
Norovirus (GI/GII) Positive Control DNA（製品コード RR251A）
【器具】
【機器】
リアルタイムPCR装置
RNA抽出試薬
Norovirus (GI/GII) Positive Control DNA（製品コード RR251A）
【器具】
- 200 μl, 20 μl, 10 μl 各マイクロピペット
- マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
【機器】
リアルタイムPCR装置
- Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
- Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）
- Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
- Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
- CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
- LightCycler 96 System（Roche Diagnostics社）
- Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
- Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
- QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96-well, 0.2 mL block) （Thermo Fisher Scientific社）など
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- 注意事項
- 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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