製品説明
NucleoMag RNA Bloodは、各種採血管
*で採取された全血サンプルから迅速にtotal RNAを精製するためのキットです。磁性ビーズ法を採用しており、各種自動化装置への対応も容易で、ハイスループットに高純度total RNAを精製可能です。
サンプルは室温で処理することができ、遠心操作などを行わずにRNAを精製することができます。
* 本製品には採血管は付属していません。別途用意する必要があります。
【対応可能な採血管】
・S-Monovette RNA Exact(SARSTEDT社)
・DNA/RNA Shield Blood Tubes(Zymo Research社)
・Tempus RNA Blood Tubes(Thermo Fisher Scientific社)
・EDTA採血管
・クエン酸ナトリウム採血管
原理 | 磁性ビーズ法 |
処理 | 自動化装置または手動 |
サンプル量 |
S-Monovette RNA Exactサンプル:820 μl
DNA/RNA Shield Blood Tubesサンプル:820 μl
Tempus Blood RNA Tubesサンプル:9 ml(全量)
EDTA採血管サンプル:260 μl
クエン酸ナトリウム採血管サンプル:260 μl |
精製サイズ | >200 bases |
結合容量 | 0.4 μg/μlビーズ |
標準的RIN値 | ≧6~10 |
回収量 | 3~4 μg(サンプルの状態に依存) |
溶出液量 | 50~100 μl |
精製時間 | 90分(自動化装置)/120分(手動) |
図1. 精製RNAの収量と純度 (1)
S-Monovette RNA ExactまたはDNA/RNA Shield Blood Tubesを用いて採取された2名のドナーの血液サンプルから、本製品とMagnetaPure 32 Plusの組み合わせ、または本製品とKingFisher Duoとの組み合わせでRNAを精製した(各試行回数3)。吸光度測定により精製RNAの収量(青い縦棒)と純度(A260/280、オレンジ色の点)を評価した結果、採血管や自動化装置の違いによる大きな差異は見られず、NucleoMag RNA Bloodにより、採血管や自動化装置によらず良好なRNAが精製されていることが示された。
図2. 精製RNAの収量と純度 (2)
Tempus RNA Blood Tubesを用いて採取された血液サンプルから、本製品とKingFisher Duoの組み合わせ(ドナー3名分)、または本製品とMagnetaPure 32 Plusの組み合わせ(別のドナー3名分)でRNAを精製した。吸光度測定により精製RNAの収量(青い縦棒)と純度(A260/280、オレンジ色の点)を評価した結果、いずれのサンプルでも良好な結果が得られた。さらに、Agilent Pico-Chipを使用して精製RNAの品質を評価したところ、すべてのサンプルで高いRIN値が得られ(平均7.7)、分解の少ない高品質、高純度なRNAであることが明らかになった。
内容
・NucleoMag B-Beads
・Binding Buffer MBR1
・Wash Buffer MBR2
・RNase-free H2O
・Liquid Proteinase K
・rDNase, lyophilized
・Reaction Buffer for rDNase
本製品以外に必要な試薬、機器(主なもの)
- 80%エタノール
- マグネティックセパレーターもしくは自動化装置
- NucleoMag SEP(製品コード 744900)
- MagnetaPure 32 Plus(製品コード 747010)
- KingFisher Duo(Thermo Fisher Scientific社)など
※多くの自動化装置に対応可能です。詳細はお問い合わせください。
- Square-well Block(製品コード 740481/740481.24)もしくは自動化装置用プレート、チップ
【EDTA採血管/クエン酸ナトリウム採血管サンプルを使用する場合】
- Lysis Buffer DL(製品コード 740202.32)
- Wash Buffer RAW(製品コード 740361.150)
【Tempus Blood RNA Tubesサンプルを使用する場合】
- Lysis Buffer DL(製品コード 740202.32)
- RNase-free Water
- Phosphate Buffered Saline (PBS)
- 50 mlコニカルチューブ
- ボルテックスミキサー
- 50 mlコニカルチューブ対応スイングローター
保存
rDNase,RNase-free(凍結乾燥品):4℃
Liquid Proteinase K:開封後は4℃または-20℃
その他:室温
操作手順
※Tempus Blood RNA Tubesサンプルを使用の場合、サンプルの溶解前に前処理(RNAペレット化)が必要です。
用途
手動または自動化装置による、各種採血管に採取した全血サンプルからのtotal RNA精製
精製RNAはcDNAライブラリー構築、マイクロアレイ、NGS、RT-qPCR などのアプリケーションにそのまま使用可能
NucleoMagはMACHEREY-NAGEL社の登録商標です。
TempusおよびKingFisherはThermo Fisher Scientific社の商標です。
DNA/RNA ShieldはZymo Research社の商標です。
MonovetteはSARSTEDT社の登録商標です。