In situ Apoptosis Detection Kit

本キットは、アポトーシスを起こした細胞の特徴の一つである断片化したクロマチンDNAを、末端標識法で組織化学的に検出するキットである。
in situでの標識核酸の取り込みを利用してアポトーシスの組織学的な局在や個々の細胞を有効に検出できるTUNEL（TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling）法を採用しており、組織切片、固定細胞どちらのサンプルも使用可能である。 また蛍光顕微鏡、光学顕微鏡さらにフローサイトメトリーでの観察も可能である。
なお本キットには発色反応用基質（DAB）や対比染色用試薬（PI、メチルグリーン）は含まれていない。（＊）

＊ TaKaRa DAB Substrate（製品コード MK210）などがご利用いただけます。

（20回分）（製品コード MK500）

1. Labeling Safe Buffer	500 μl×2
2. TdT Enzyme	50 μl×2
3. Anti- FITC HRP Conjugate	1.5 ml
4. Control Slides	2 slides
5. Permeabilisation Buffer	1.0 ml×2

4. Control Slideはラット乳腺組織のパラフィン包埋切片である。
Positive Control Slideとして使用する際はまず最初に、脱パラフィンの操作を行った後、キット説明書の「操作手順」（パラフィン包埋組織切片の場合）に従って用いる。
脱パラフィンとProteinase K処理を行った後は、観察方法に応じたプロトコール通りに操作を行う。
キットの各コンポーネントは単品（Bulk）でも販売している（製品コード MK501～MK505）。

1. 2. 5.：－20℃
3. ：4℃（輸送時は－20℃。一度融解した後は4℃で保存。）
4. ：室温（輸送時は－20℃）

TUNEL法はアポトーシスを起こした細胞の断片化DNAの遊離3'-OH末端を、ターミナルトランスフェラーゼ（TdT）を用いて、フルオレセインーdUTPで高効率かつ特異的に標識した後、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーで検出する方法である。取り込まれたフルオレセインは、パーオキシダーゼ標識抗フルオレセイン抗体を用いた発色反応を行うことにより、光学顕微鏡での観察もできる。