Xfect™ トランスフェクション試薬

Xfect Transfection Reagentは広範な哺乳類細胞へ高効率にプラスミドDNAを導入することができる新しいトランスフェクション試薬である。
本試薬による遺伝子導入は、約2,300種類もの中から選び出されたXfect Polymerにより形成される生分解性ナノ粒子を介して行われる。この新しい遺伝子導入原理により、非常に高い導入効率が得られる一方で、遺伝子導入試薬による細胞毒性は低く抑えられている。また、遺伝子導入は、通常の血清含有培地中で行えるため、操作も簡便である。

Xfect Transfection Reagentと他社遺伝子導入試薬を比較した実験でも、HeLa、HEK 293、CHO-K1、HT1080細胞においてXfect Transfection Reagentがもつ高い遺伝子導入効率（図1パネルA）と、低い細胞毒性が確認できた（表1）。また、一般的にトランスフェクションが非常に難しいJurkat細胞への遺伝子導入比較実験でも、Xfect Transfection Reagentを用いた場合に他社製品より40倍以上高い遺伝子導入効率が得られた（図1パネルB）。


図1. Xfect Transfection Reagentを用いた広範な哺乳類細胞への遺伝子導入例
Xfect Transfection Reagentと他社製品L（パネルA）、Xfect Transfection Reagentと他社製品LX（パネルB）を用いて、それぞれの推奨プロトコールに従ってAcGFP1をコードするプラスミドDNAを各細胞に導入した。48時間後、AcGFP1の発現をフローサイトメーターを用いて解析し、遺伝子導入効率を算出、比較した。



図2. Xfect Transfection Reagentを用いた実験概要
Xfect Transfection Reagentでは遺伝子導入操作を血清存在下で行うことができ、操作ステップも最小限に抑えることができる。
（2012年11月よりプロトコールが一部改良され、シングルチューブでの試薬調製が可能になりました。なお、これまでのチューブを2本使用するプロトコールも使用可能です。両プロトコール間のトランスフェクション効率に差はありません。）

プラスミドDNA遺伝子導入（操作方法を動画でご覧ください）




表1. Xfect Transfection Reagentで遺伝子導入した細胞は高い生存率を示す

	Xfect Transfection Reagent（%）	他社製品 L（%）
HeLa	79.4±17.9	53.2±26.7
HEK 293	63.5±12.5	52.3±12.4
CHO-K1	86±0.8	90.9±10.7
MCF7	51.4±10.6	29.7±21.3

＜Clontechで確認＞
HeLa, HEK 293, 293T, NIH/3T3, CHO

＜Xfect Transfection Reagent使用ユーザー様からいただいた情報＞

Bone Cells	MC3T3、U2-OS
Colon Cells	Caco-2、HT-29
Epithelial Cells	16HBE、A431、As4.1、BEAS-2B、B16-F10、BSC1、Caco-2、EpH4、HaCaT、HC11、HEK-293、HEK-293T、hOSE、HT-1080、HT-29、Lens epithelial cells (human)、MCF7、MDCK、T-47D、WRL 68、A549、Caco-2,EpH4、H1299、Hepa 1-6
Endothelial Cells	Aortic endothelia (human)、HUVEC、Myoendothelia (human)
Fibroblasts	BHK-21、BJ fibroblasts、Chick fibroblasts、COS-7、HT1080、Mouse embryonic fibroblasts (MEF)、NIH3T3、Rat2、Swiss mouse embryonic fibroblasts
Immune Cells	Jurkat、DC2.4、K-562、RAW 264.7、RBL-2H3、SupT1、NALM-6
Kidney Cells	As4.1、BHK-21、B-S-C1、COS-7、HEK-293、HEK-293T、Renal proximal tubules (mouse)、293FT
Lung Cells	16HBE、BEAS-2B、A549、H1299
Muscle Cells	Aortic smooth muscle (human)、Cardiomyocytes (primary rat)、C2C12、Myoblasts (primary human)、Smooth muscle cells (primary human)
Neural-Based	HEI-193 (human Schewann)、SH-SY5Y、Astrocytes (primary mouse)
Reproductive Organs	CHO、EpH4、HC11、HeLa、hOSE、LbT2、MCF7、PC3、T-47D
Stem Cells	hADSC (Adipose)、hMSC (Mesenchymal)、Mesenchymal Progenitor、P19

＜国内のXfect Transfection Reagent使用ユーザー様からいただいた情報＞

Cell Type	Efficiency	Viability
293	80%	80%
293FT	70-80%	100%
293T	< 90%	> 90%
CHO-K1	80%	95%
HeLa	80%	90%
MEF	60%	95%
HFK（ヒト表皮角化細胞）	60%	80%
HDF（ヒト皮膚線維芽細胞）	50%	90%
HT1080（ヒト線維肉腫細胞）	80%	90%

Xfect Transfection Reagent
（製品コード 631317：100回^*、631318：300回^*）
・Xfect Polymer
・Xfect Reaction Buffer

* 6ウェルフォーマットプレートの1ウェルでの反応回数

－20℃