Provirus Copy Number Detection Primer Set, Human (for Real Time PCR)

Provirus Copy Number Detection Primer Set, Human (for Real Time PCR) は、リアルタイムPCRを利用してMLV（murine leukemia virus：マウス白血病ウイルス）ベースのレトロウイルスベクターでヒト正常細胞^*へ遺伝子導入した際のプロウイルスコピー数を測定する ためのセットである。プロウイルスとは、ウイルスゲノムが宿主細胞のゲノムに組み込まれた状態であり、細胞内でレトロウイルスゲノムは宿主のゲノムDNAに組み込まれてプロウイルスとなる。
本セットをCycleavePCR Core Kit（製品コード CY501）と組み合わせて使用することで、遺伝子導入したヒト正常細胞のゲノムDNAからプロウイルスコピー数を測定する事が可能である。また、MLVのパッケージングシグナル部分を増幅対象にしているので、ほぼすべてのMLVベースのレトロウイルスベクターで遺伝子導入したヒト正常細胞のプロウイルスコピー数を測定することができる。
プロウイルスコピー数を測定する方法として、遺伝子導入した細胞をクローン化し、サザンブロッティングにより測定して、平均プロウイルスコピー数を算出する方法が考えられるが、平均プロウイルスコピー数を算出するためには多くのクローンを取得してサザンブロッティングを行う必要があり、非常な労力と時間を要することが予測される。本セットを用いることで細胞をクローン化することなく簡単に平均プロウイルスコピー数を算出する事が可能である。
併用するCycleavePCR Core Kitは、特異性の高いサイクリングプローブを用いるリアルタイムPCRのためのコアキットであり、ターゲットの定量をゲノムDNAのバックグラウンドを抑えて正確かつ簡便に行うことができる。

本製品の測定原理についてはこちらをご覧ください。

*	注意
	本セットは遺伝子導入したヒト細胞用であり、ヒト以外の細胞には使用できない。また、正常細胞など、常染色体が2倍体のものに限る。

（25 μl反応、100回）

1.	Retrovirus Primer Mix for Provirus（10 pmol/μl each）	50 μl
2.	Retrovirus Probe for Provirus（10 pmol/μl）*	50 μl
3.	hIFNg Primer Mix for Provirus（10 pmol/μl each）	50 μl
4.	hIFNg Probe for Provirus（10 pmol/μl）*	50 μl
5.	DNA Control Template for Provirus, Human（200 pg/μl）	15 μl
6.	EASY Dilution（for Real Time PCR）	1 ml×4

* 蛍光標識プローブ（FAM）につき遮光に留意すること。

－20℃

CycleavePCR Core Kit（製品コード CY501）