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レトロウイルスベクターによる 遺伝子導入細胞 |
| ゲノムDNA抽出 | |
Real time PCR（サイクリーブプローブ法）による、レトロウイルスとヒトIFNγの定量
レトロウイルス用検量線 |
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| DNA Control (fg/ul) |
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ヒトIFNγ用検量線 |
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| DNA Control (fg/ul) |
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プロウイルスコピー数＝（a/b）×2
レトロウイルスとヒトIFNγ（インターフェロンγ）それぞれの最適領域が1コピークローニングされたDNA controlを用いて2種類（レトロウイルスとヒトIFNγ）の検量線を作成し、目的サンプルのゲノムDNA中のレトロウイルスとヒトIFNγの定量を行う。
ヒトIFNγの増幅領域はゲノム染色体に1コピーなので、ヒトIFNγに対するレトロウイルスの比率はa/bになり、正常細胞は常染色体が2倍体なので、2を掛けた数字がプロウイルスコピー数となる。
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