製品説明
Tet-Off Advanced（第2世代）、Tet-Off（第1世代）Cell Lineは、テトラサイクリン発現誘導システムの、テトラサイクリン制御性トランス活性化因子（tTA）を安定的に発現する細胞株である。テトラサイクリン応答因子（TRE）promoter制御下で目的遺伝子を発現するベクターをTet-Off細胞株に導入するだけで、ドキシサイクリン（Dox）非存在下で目的遺伝子の発現を誘導することができる。
システム構築にかかる時間を大幅短縮
システムの構築は簡単に行うことができる。まず、TREプロモーター(PTRE3Gなど)の下流に目的遺伝子をクローニングし、その後、このプラスミドをTet-Off細胞株（G418-耐性）に導入し、安定発現株の選抜を行う。tTAを安定的に発現する本細胞株を用いることにより、Tet-Offシステムの構築に要する時間を約２ヵ月間短縮することができる。
図1. Tet-Offシステムの発現誘導原理
テトラサイクリン制御性トランス活性化因子（tTA）は、ドキシサイクリン（Dox）の非存在下でテトラサイクリン応答因子（TRE）プロモーターに結合し目的遺伝子の発現を活性化する。Tet-Off Cell LineはこのtTAを安定的に発現する細胞株である（図は第1世代のTet-Off Systemを示す）。
図2. HEK 293 Tet-Off Advanced Cell Lineを用いたルシフェラーゼ遺伝子の発現誘導
HEK 293 Tet-Off Advanced Cell LineにpTRE-Tight-luciferase vectorを導入し、Dox存在下と非存在下での発現を確認した。Dox非存在下ではルシフェラーゼの高い発現が確認できるが、Dox存在下では基底発現も検出レベル以下であった。
図1. Tet-Offシステムの発現誘導原理
テトラサイクリン制御性トランス活性化因子（tTA）は、ドキシサイクリン（Dox）の非存在下でテトラサイクリン応答因子（TRE）プロモーターに結合し目的遺伝子の発現を活性化する。Tet-Off Cell LineはこのtTAを安定的に発現する細胞株である（図は第1世代のTet-Off Systemを示す）。
図2. HEK 293 Tet-Off Advanced Cell Lineを用いたルシフェラーゼ遺伝子の発現誘導
HEK 293 Tet-Off Advanced Cell LineにpTRE-Tight-luciferase vectorを導入し、Dox存在下と非存在下での発現を確認した。Dox非存在下ではルシフェラーゼの高い発現が確認できるが、Dox存在下では基底発現も検出レベル以下であった。
内容
- Tet-Off Cell Line
- Tet-Off Luciferase Control Cell Line
- Tet System Approved FBS（製品コード 631105）
保存
細胞：液体窒素*
FBS：－20℃
FBS：－20℃
| * | 到着後、ただちに液体窒素中で保存すること。 液体窒素保存ができない場合は、ただちに細胞を融解し、培養を行うこと。 |
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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