一般細菌数をリアルタイムPCRで定量
【重要なお知らせ】
弊社リアルタイムPCR装置「Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ」において弊社遺伝子検査キットを使用する場合の解析条件を変更いたしました。
変更の詳細はこちら
取扱説明書およびその他製品に付随する文書は、順次更新予定です。
弊社リアルタイムPCR装置「Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ」において弊社遺伝子検査キットを使用する場合の解析条件を変更いたしました。
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製品説明
本製品は、リアルタイムPCR により一般細菌数を定量するためのキットである。2～4日の培養を必要とする従来法に比べ、迅速に結果を得ることができ、食品・環境分野の自主管理等に有用である。また、培養法では、菌種によって最適な培養条件が異なるため、検体の種類や貯蔵条件等を考慮し、検体に存在する菌種に応じて培地組成や培養温度を工夫する必要があるが、本製品のリアルタイム法では、菌種間での保存性が高く、染色体上に低コピー（1または2コピー）で存在しているタンパク質伸長因子Tu(tuf)遺伝子を検出対象としている為、一度に広範な細菌種の細菌数を測定することができる。
本キットの開発には、東京海洋大学 木村凡先生、高橋肇先生、東洋水産株式会社 田中悠一郎氏にご協力いただきました。
（参考）tuf遺伝子の配列情報から検出可能と推測される菌種
GenBankに登録された1,561 種のバクテリアゲノム配列（2011年11月21日現在）から”tuf”または”elongation factor”という名前が付いている遺伝子配列10,855種を抽出し、本製品のプライマー配列に100％マッチするものをリスト化しました。→リストはこちら
本キットの開発には、東京海洋大学 木村凡先生、高橋肇先生、東洋水産株式会社 田中悠一郎氏にご協力いただきました。
（参考）tuf遺伝子の配列情報から検出可能と推測される菌種
GenBankに登録された1,561 種のバクテリアゲノム配列（2011年11月21日現在）から”tuf”または”elongation factor”という名前が付いている遺伝子配列10,855種を抽出し、本製品のプライマー配列に100％マッチするものをリスト化しました。→リストはこちら
内容
| （25 μl反応、100回分） | ||
| TB Green Premix Ex Taq GC＊1 | 2×conc. | 625 μl×2 |
| TUF Primer Mix | 5×conc. | 250 μl×2 |
| dH2O | 1 ml | |
| ROX Reference Dye＊2 | 50×conc. | 50 μl |
| ROX Reference Dye II＊2 | 50×conc. | 50 μl |
| TUF Positive Control | 1×105 copies/μl | 100 μl |
| EASY Dilution (for Real Time PCR) | 1 ml×2 | |
*1 TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, Mg2＋、TB Greenを含む。
*2 Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用する。
- ROX Reference Dye（50×）を添加する機種
・ StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - ROX Reference Dye II（50×）を添加する機種
・ Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - 添加の必要がない機種
・ Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード T700/TP760：終売）
保存
TB Green Premix Ex Taq GC（Package1）
その他のコンポーネント（Package2）
－20℃保存
4℃保存：6ヵ月安定（長期保存は－80℃）
必ず遮光して保存してください。また、4℃保存する場合には、コンタミネーションに十分注意してください。
必ず遮光して保存してください。また、4℃保存する場合には、コンタミネーションに十分注意してください。
| ＊ | 長期保存する際は、－80℃で保存してください。（－20℃保存は避けてください。）いったん融解したものは4℃で保存し、6ヵ月を目処にご使用ください。 |
－20℃保存
キット以外に必要な機器、試薬（主なもの）
＜サンプル懸濁液調製に必要なもの＞
＜DNA抽出に必要なもの＞
＜リアルタイムPCRに必要なもの＞
リアルタイムPCR用増幅装置および専用チューブ
マイクロピペット
希釈水（0.1％ペプトン加生理食塩水等、検体の種類に応じて選択）
ストマッカーおよびストマッカー袋
ストマッカーおよびストマッカー袋
＜DNA抽出に必要なもの＞
NucleoSpin Tissue（製品コード 740952.10/.50/.250）
特級エタノール（＞99%）
ヒートブロック（56℃および70℃で使用可能なもの）
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
微量高速遠心機
20 mg/ml lysozyme
特級エタノール（＞99%）
ヒートブロック（56℃および70℃で使用可能なもの）
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
微量高速遠心機
20 mg/ml lysozyme
＜リアルタイムPCRに必要なもの＞
リアルタイムPCR用増幅装置および専用チューブ
Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
卓上遠心機Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
マイクロピペット
補足資料
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
定量解析（絶対定量モード）用（PDF、993 K）
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
定量解析（絶対定量モード）用（PDF、993 K）
- 注意事項
- 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
