一般細菌数をリアルタイムPCRで定量
製品説明
本製品は、リアルタイムPCRにより一般細菌数を定量するためのキットです。2～4日の培養を必要とする従来法に比べ、迅速に結果を得ることができ、食品・環境分野の自主管理等に有用です。また、培養法では、菌種によって最適な培養条件が異なるため、検体の種類や貯蔵条件等を考慮し、検体に存在する菌種に応じて培地組成や培養温度を工夫する必要がありますが、本製品のリアルタイム法では、菌種間での保存性が高く、染色体上に低コピー（1または2コピー）で存在しているタンパク質伸長因子Tu(tuf)遺伝子を検出対象としている為、一度に広範な細菌種の細菌数を測定することができます。
本製品の開発には、東京海洋大学 木村凡先生、高橋肇先生、東洋水産株式会社 田中悠一郎氏にご協力いただきました。
（参考）本製品のプライマー配列から検出可能と推測される菌種
弊社にてTaxonomy IDをもとにGenBankより選出した微生物全般配列229,979種（2025年7月14日現在）のうち、本製品のプライマー配列に100％マッチするものをリスト化しました。→リストはこちら
本製品の開発には、東京海洋大学 木村凡先生、高橋肇先生、東洋水産株式会社 田中悠一郎氏にご協力いただきました。
（参考）本製品のプライマー配列から検出可能と推測される菌種
弊社にてTaxonomy IDをもとにGenBankより選出した微生物全般配列229,979種（2025年7月14日現在）のうち、本製品のプライマー配列に100％マッチするものをリスト化しました。→リストはこちら
内容
| （100回分、25 μl反応系） | ||
| TB Green Premix Ex Taq GC＊1 | 2×conc. | 625 μl×2 |
| TUF Primer Mix | 5×conc. | 250 μl×2 |
| dH2O | 1 ml | |
| ROX Reference Dye＊2 | 50×conc. | 50 μl |
| ROX Reference Dye II＊2 | 50×conc. | 50 μl |
| TUF Positive Control | 1×105 copies/μl | 100 μl |
| EASY Dilution (for Real Time PCR) | 1 ml×2 | |
*1 TaKaRa Ex Taq HS、dNTP Mixture、Mg2＋、TB Greenを含む。
*2 Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用する。
- ROX Reference Dye（50×）を添加する機種
・ Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - ROX Reference Dye II（50×）を添加する機種
・ Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - 添加の必要がない機種
・ Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
・ Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード T700/TP760：終売）
保存
TB Green Premix Ex Taq GC（Package1）
その他のコンポーネント（Package2）
－20℃保存
4℃保存：6ヵ月安定（長期保存は－80℃）
必ず遮光して保存してください。また、4℃保存する場合には、コンタミネーションに十分注意してください。
必ず遮光して保存してください。また、4℃保存する場合には、コンタミネーションに十分注意してください。
| ＊ | 長期保存する際は、－80℃で保存してください（－20℃保存は避けてください）。いったん融解したものは4℃で保存し、6ヵ月を目処にご使用ください。 |
－20℃保存
本製品以外に必要な試薬、器具、機器（主なもの）
＜サンプル懸濁液調製に必要なもの＞
＜DNA抽出に必要なもの＞
＜リアルタイムPCRに必要なもの＞
リアルタイムPCR用増幅装置および専用チューブ
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
希釈水（0.1％ペプトン加生理食塩水等、検体の種類に応じて選択）
ストマッカーおよびストマッカー袋
ストマッカーおよびストマッカー袋
＜DNA抽出に必要なもの＞
NucleoSpin Tissue（製品コード 740952.10/.50/.250）
特級エタノール（＞99%）
ヒートブロック（56℃および70℃で使用可能なもの）
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
微量高速遠心機
20 mg/ml lysozyme in 20 mM Tris-HCl, 2 mM EDTA, 1％ Triton X-100 (pH8.0)
特級エタノール（＞99%）
ヒートブロック（56℃および70℃で使用可能なもの）
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
微量高速遠心機
20 mg/ml lysozyme in 20 mM Tris-HCl, 2 mM EDTA, 1％ Triton X-100 (pH8.0)
＜リアルタイムPCRに必要なもの＞
リアルタイムPCR用増幅装置および専用チューブ
Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
卓上遠心機Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
補足資料
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意しています。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用してください。
定量解析（絶対定量モード）用（PDF、993 K）
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用してください。
定量解析（絶対定量モード）用（PDF、993 K）
「遺伝子検査（食品・水質・家畜他）」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。
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- 注意事項
- 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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