乳癌細胞に最適化したトランスフェクション試薬
- 乳がん細胞に最適化されたトランスフェクション試薬
- 従来のリポソーム法に比べ細胞毒性が低い
- 優れたトランスフェクション効率
- MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468、T47Dなどの乳がん細胞で高発現を実現
製品説明
TransIT-BrCa Transfection Reagentは、乳がん細胞用トランスフェクション試薬である。他のTransITシリーズと同様、細胞に対する毒性が低く、多くの乳がん細胞で高い導入効率を得ることができる。
図1．TransIT-BrCa Transfection Reagentを用いた乳がん細胞株のトランスフェクション
TransIT-BrCa Transfection Reagentを用いてGFP発現プラスミドを乳がん細胞株MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468 、T47Dにトランスフェクションし、48時間後に蛍光顕微鏡で観察した。トランスフェクションには35 mmディッシュ（MatTek社）を使用し、4 μlの試薬に対して2 μgのプラスミドDNAを用いた（試薬：DNA＝2：1）。
図2．各種乳がん細胞株へのプラスミド導入効率
TransIT-BrCa Transfection Reagentを用いて乳がん細胞株MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468、T47DにGFP発現プラスミドをトランスフェクションし（n＝3）、48時間後に導入効率を調べた。24 wellプレートを使用し、1.0～1.5 μlの試薬に対して0.5 μgのプラスミドDNAを用いた（試薬：DNA＝2：1 または 3：1）。
図1．TransIT-BrCa Transfection Reagentを用いた乳がん細胞株のトランスフェクション
TransIT-BrCa Transfection Reagentを用いてGFP発現プラスミドを乳がん細胞株MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468 、T47Dにトランスフェクションし、48時間後に蛍光顕微鏡で観察した。トランスフェクションには35 mmディッシュ（MatTek社）を使用し、4 μlの試薬に対して2 μgのプラスミドDNAを用いた（試薬：DNA＝2：1）。
図2．各種乳がん細胞株へのプラスミド導入効率
TransIT-BrCa Transfection Reagentを用いて乳がん細胞株MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468、T47DにGFP発現プラスミドをトランスフェクションし（n＝3）、48時間後に導入効率を調べた。24 wellプレートを使用し、1.0～1.5 μlの試薬に対して0.5 μgのプラスミドDNAを用いた（試薬：DNA＝2：1 または 3：1）。
図3. 他社製品との比較
乳がん細胞株MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453, MDA-MB-468、T47Dにルシフェラーゼ発現プラスミドをトランスフェクションして発現量を比較した。トランスフェクションは96 wellプレートを用いて0.1 μg DNA/well（試薬：DNA＝2：1、3：1、4：1）で実施し（n＝3）、24時間後にルシフェラーゼアッセイを行った。
図4. MCF-7細胞を用いたEstrogen Receptor Pathway活性化試験
活性炭処理FBSを含む完全培地で3日間培養したMCF-7（estrogen receptor 陽性）、およびMDA-MB-231（estrogen receptor陰性）にTransIT-BrCa Transfection Reagentを用いてERE-luciferase reporterプラスミドまたはネガティブコントロール（ERE Reporter kit；SA Biosciences）をトランスフェクションした（96 wellプレート使用、試薬：DNA＝2：1, n＝3）。24時間後、細胞を17-estradiol (E2)で6時間処理し、トランスフェクションから30時間後にルシフェラーゼアッセイを行った。プロモーター活性は、Renilla luciferase（恒常発現）に対するFirefly luciferase（ERE応答により発現）の相対活性（Relative Luciferase Unit）として示している。
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トランスフェクション試薬選択 オンラインツール
◆選択ガイド
実験目的別に、各標的細胞に最適な遺伝子導入試薬（Mirus社製品）をまとめました。
効率的な試薬の選択にご活用ください。
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▶ 遺伝子導入試薬 選択ガイド（Mirus社）
◆検索ツール
“Reagent Agent”は、Mirus社が提供するトランスフェクション試薬の検索ツールです。
細胞と導入する核酸の種類から、推奨されるトランスフェクション試薬を検索することができます。
細胞と導入する核酸の種類から、推奨されるトランスフェクション試薬を検索することができます。
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