Nickel レジン-磁気ビーズ

His60 Ni Magnetic Beadsは、迅速かつ簡便にHisタグ融合タンパク質を分離・精製できる磁気ビーズである。マグネチックセパレーターで分離するため、マイクロスケール量のタンパク質の分離にも適している。改良されたNi-IDAの採用により、高い結合容量を実現しつつ、金属イオンの漏れを防ぎ、高純度なHisタグ融合タンパク質を精製できる。精製タンパク質は少容量（50～200 μl）で溶出されるため、高濃度なサンプル（＜3 mg/ml）を調製することができる。His60 Ni Magnetic Beadsは5％の懸濁液として供給され、懸濁液1 ml当たりのタンパク質結合容量は1.65 mgである。
マイクロスケールでの精製はタンパク質の発現スクリーニングやタンパク質間相互作用の解析に適している。さらに、His60 Ni Superflow Resin（製品コード 635659など）を用いた精製工程にスムーズにスケールアップすることができる。

Lane M：Spectra Multicolor Broad Range Protein Ladder Lane 1：ライセート上清 Lane 2：フロースルー Lane 3：洗浄1回目 Lane 4：洗浄2回目 Lane 5：洗浄3回目 Lane 6：溶出1回目 Lane 7：溶出2回目 Lane 8：溶出3回目 Lane 9：溶出4回目

図1. His60 Ni Magnetic Beads による非変性条件下でのHisタグ融合タンパク質の精製
6×His融合AcGFP1を発現する大腸菌から調製した細胞ライセート上清 400 μlをHis60 Ni Magnetic Beadに添加し、30分間結合させた。ビーズをWash Buffer 500 μlを用いて3回洗浄後、Elution Buffer 100 μlで4回の抽出を行った（BufferはHis60 Ni Buffer Setを使用。Wash Bufferは同SetのElution BufferとEquilibration Bufferを混合して作成）。各サンプルから10 μlを取り、12％ SDS-PAGEにより解析を行った結果を示す。

Lane M：Spectra Multicolor Broad Range Protein Ladder Lane 1：ライセート上清 Lane 2：フロースルー Lane 3：洗浄1回目 Lane 4：洗浄2回目 Lane 5：洗浄3回目 Lane 6：洗浄4回目 Lane 7：溶出1回目 Lane 8：溶出2回目 Lane 9：溶出3回目

図2. His60 Ni Magnetic Beads による変性条件下でのHisタグ融合タンパク質の精製
6×His融合AcGFP1を発現する大腸菌から調製した細胞ライセート上清 500 μlをHis60 Ni Magnetic Beadに添加し、30分間結合させた。ビーズをEquilibration Buffer 500 μlを用いて3回洗浄後、Wash Buffer 500 μlで1回洗浄し、Elution Buffer 50 μlにより3回の抽出を行った（すべてのバッファーには8M尿素を添加）。各サンプルから10 μlを取り、4-20％ SDS-PAGEにより解析を行った結果を示す。

His60 Ni Magnetic Beads（製品コード 635693）　1 ml

His60 Ni Buffer Set（製品コード 635665）

• His60 Ni Equilibration Buffer　250 ml×2
• His60 Ni Elution Buffer　200 ml
• His60 Ni xTractor Buffer　100 ml

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