TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit Ver.2

ノロウイルス（NoV）は、急性胃腸炎の主要な原因ウイルスです。感染源は、感染者の排泄物（便あるいは吐物）やNoVを保有する二枚貝（カキなど）と推定されています。感染すると数日の潜伏期間後に、主に嘔吐、下痢、腹痛、発熱（37～38℃）などの症状が現れます。NoVは、構造的に表面をカップ状の窪みをもつタンパク質で覆われ、内部にプラス一本鎖RNAの遺伝子を有しています。今のところ、組織培養法などを用いてのNoVの分離・検出が困難なため、逆転写PCR法やリアルタイムPCR法などによって、ウイルスの検査診断が行われています。Genogroup I～Vの5つの遺伝子群に分類され、ヒトはGenogroup I (GI)とII (GII)に感染することが示唆されています。
本製品は、厚生労働省 医薬食品局 食品安全部 監視安全課より通知された｢ノロウイルスの検出法について｣（平成15年11月5日付け食安監発第1105001号別添）（最終改正：平成25年10月22日付け食安監発1022第1号）（以下「通知」と記載する）と同じ塩基配列のGI検出用およびGII検出用プライマーならびにプローブを使用したリアルタイムPCR法によるNoV検出キットです。蛍光物質を使用してPCR増幅産物をリアルタイムで解析するリアルタイムPCR法は、簡便性、迅速性、反応特異性の高さから、近年、食品などのNoVの検出を含め、種々の病原体の検査診断法に用いられています。

※ 本製品の製品化にあたっては、群馬パース大学大学院 木村博一教授に監修いただきました。

RR265A（RT 50回分、GI 反応50回分^＊1、GII 反応50回分^＊1）
＊1 8段階濃度、n＝3で検量線の作成を行い、cDNAサンプル、陰性コントロールについてn＝2で検出を行う場合、本製品では12検体の測定が可能です。
＊2 逆転写反応用試薬です。
＊3 dNTP MixtureおよびMg²⁺ を含みます。
＊4 RNase Inhibitorを含みます。
＊5 TaKaRa Ex Taq HS、dNTP Mixture、Mg²⁺ を含みます。
＊6 通知と同じ塩基配列を採用しています。
＊7 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意してください。
＊8 Thermo Fisher Scientific社のリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用してください。
　◆ ROX Reference Dyeを添加する機種

• Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）

　◆ ROX Reference Dye IIを添加する機種

• Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
• QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96-well, 0.2 mL block)（Thermo Fisher Scientific社）

　◆ 添加の必要がない機種

• Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
• Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）
• Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
• Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
• CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
• LightCycler 96 System（Roche Diagnostics社）

－20℃
Premix Ex Taq (NV)（2×conc.）は、いったん融解したものは4℃保存し、6ヵ月を目途にご使用ください。長期保存の場合は、−20℃で凍結保存可能です。

【試薬】

• RNA抽出試薬
• Norovirus (GI/GII) Positive Control DNA（製品コード RR251A）

【器具】

• 200 μl, 20 μl, 10 μl 各マイクロピペット
• マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）

【機器】
リアルタイムPCR装置

• Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
• Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）
• Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
• Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
• CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
• LightCycler 96 System（Roche Diagnostics社）
• Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
  
• Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
• QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96-well, 0.2 mL block) （Thermo Fisher Scientific社）など

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分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

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