長鎖のcDNA増幅に

TaKaRa RNA LA PCR™ Kit (AMV) Ver.1.1

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製品コード TaKaRa
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TKR RR012A RR012A TaKaRa RNA LA PCR™ Kit (AMV) Ver.1.1
  • バルクなど特別対応可能
100回 ¥56,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

本製品は、RNAをcDNAに変換した後にPCRを行う2ステップRT-PCRのためのキットであり、AMV(Avian Myeloblastosis Virus)由来のAMV RTase XLによるRNAからのcDNA合成、および長鎖増幅に適したTaKaRa LA TaqによるcDNAを鋳型としたPCR増幅を一本のチューブ内で行うことができる。本製品のOligo dT-Adaptor PrimerはpolyA+ RNAの3'末端からのcDNA合成をさらに効率良く行えるよう工夫されている。これにより3'-RACE法による未知の3'末端の増幅を効率良く行うことができる。

内容

(100回分)*1
AMV Reverse Transcriptase XL*2 (5 U/μl) 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
Random 9 mers (50 pmol/μl) 50 μl
Oligo dT-Adaptor Primer (2.5 pmol/μl) 50 μl
RNase Free dH2O 1 ml
TaKaRa LA Taq (5 U/μl) 25 μl
M13 Primer M4 (20 pmol/μl) 50 μl
10×RNA PCR Buffer*3 120 μl
10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Free) 500 μl
dNTP Mixture (各10 mM) 150 μl
MgCl2 (25 mM) 1 ml
Control F-1 Primer (20 pmol/μl)*4 25 μl
Control R-1 Primer (20 pmol/μl)*5 25 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl)*6 25 μl

*1 [10 μl逆転写反応→50 μl PCR反応]の100回分
*2 Life Sciences Advanced Technologies社で製造されたものです。
*3 100 mM Tris-HCl (pH8.3)、500 mM KCl
*4 Positive Control RNA用上流プライマー
*5 Positive Control RNA用下流プライマー
*6 pSPTet3プラスミドの転写polyA RNA

保存

-20℃

特長

RNAテンプレート 全般
増幅サイズ 少なくとも12 kbまでは増幅可能
逆転写酵素 AMV Reverse Transcriptase XL(42~60℃で逆転写可能)
DNA Polymerase TaKaRa LA Taq
RNase Inhibitor 必要(キットに含まれる)
1st strand cDNA
合成用プライマー
Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer、特異的下流プライマーより選択可
3’-RACE法 RT時にOligo dT-Adaptor Primer、そしてPCR時にM13 Primer M4を使用することにより3’-RACE法に対応
操作 1本のチューブ内で反応可。熱処理により逆転写酵素活性を失活させた後、PCRを行う。


TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1は、AMV RTase XLによるRNAからのcDNA合成を行い、続けて同一チューブ内でTaKaRa LA Taq によるPCR増幅を行う。
RNAからcDNA合成を行う際のプライマーとしてRandom 9 mers、Oligo dT-Adaptor PrimerあるいはcDNAの下流部分の配列を有する特異的なプライマー(特異的下流プライマー)を用いることができる。3’-RACE法を行う際はOligo dT-Adaptor Primerを用いる。

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