遺伝子型判定に最適

MightyAmp™ Genotyping Kit

  • PCR増幅による遺伝子型判定に最適
  • マウス尾、植物葉、コメなどから簡単DNA抽出
  • MightyAmpで強力増幅
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR R074A R074A MightyAmp™ Genotyping Kit
200回 ¥52,500
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

MightyAmp Genotyping Kitは、マウス尾などの動物組織や植物組織等から、簡便に、DNAを抽出してPCR増幅を行うための製品である。
本製品に含まれる専用抽出バッファーとProteinase Kにより、動植物組織等から直接DNA抽出が可能である。
PCRにはクルードサンプルに対して強力な増幅性を示すMightyAmp DNA Polymeraseを使用するため、通常のPCR酵素では増幅が困難なPCR阻害物質を多く含む粗抽出液から、GCリッチ、ATリッチを問わず、広範囲なターゲットの増幅が可能である。特に2 kb程度までの短鎖DNAの増幅に威力を発揮し、少量の鋳型からでも良好な反応性を示す。
さらに、混在する夾雑物の影響を軽減する専用Loading Dyeを用いてPCR増幅産物をアガロースゲル電気泳動することにより、短時間に良好な検出が可能となり、遺伝子型判定にも最適である。
なお、本酵素は、98℃までポリメラーゼ活性を抑制する強力なモノクローナル抗体を用いたホットスタートPCR用の酵素であり、非特異的増幅を防ぐことができる。

内容

(200回用)*1
1.MightyAmp DNA Polymerase(1.25 U/μl)200 μl
2.2×MightyAmp Buffer(Mg2+, dNTP plus)*21.25 ml×4
3.5×Loading Dye1 ml×3
Extraction Buffer20 ml
5.Proteinase K(20 mg/ml)200 μl

*1 反応容量50 μlでの回数。
*2 Mg2+濃度は4 mM(2×)、dNTP濃度は各800 μM(2×)。

保存

-20℃
Extraction Buffer は開封後室温保存

プライマー設計について

  • OLIGO Primer Analysis Software(Molecular Biology Insights社)などのプライマー設計ソフトを利用して、最適な配列を選択することをお勧めする。
    Tm値(下記の式で計算)が60℃以上になるように設計することを推奨する。
      Tm値(℃)=[(A、Tの数)×2]+[(G、Cの数)×4]-5


  • MightyAmp DNA Polymeraseの場合、イノシンを含むプライマーの使用は避ける。

増幅産物の末端形状

MightyAmp DNA Polymeraseを用いて増幅したPCR産物のほとんどは3’末端にAが1塩基付加されている。そのため、PCR産物を直接T-Vector(pMD20:製品コード 3270、pMD19(Simple):製品コード 3271など)にクローニングすることができる。また、Mighty Cloning Reagent Set(Blunt End)(製品コード 6027)で平滑末端化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

トラブルシューティング

現象問題点対策
増幅しない
増幅効率が悪い
プライマーのTm値上記の式を参考にプライマー設計する
2 step PCR3 step PCRを試す
3 step PCR2 step PCRを試す
(3 step PCRで増幅しないものが2 stepで増幅する場合がある)
アニーリング温度2℃ずつ下げてみる
サイクル数サイクル数を最大40 cyclesまで増やす
サンプルの量・調製法・PCR反応液に持ち込む抽出液の使用量を減らす、または増やす
・抽出液へ持ち込む試料の量を減らす、または増やす
非特異的増幅が著しいプライマーのTm値上記の式を参考にプライマー設計する
3 step PCR2 step PCRを試す
サイクル数サイクル数を25~30 cyclesに設定

この製品を見た人は、こんな製品も見ています。

注意事項
  • 弊社の取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
  • タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
    また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。
  • ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。

▲このページのトップへ