Uracil DNA Glycosylase (UNG)は、ウラシルを含むDNA中のデオキシリボースとウラシル塩基の間のN-グリコシド結合を加水分解し、脱ピリミジン部位を作る。本酵素は、一本鎖と二本鎖のウラシルを含むDNAを加水分解するが、RNAに対しては作用しない。

20 mM	Tris-HCl, pH8.0 (at 4℃)
100 mM	KCl
1 mM	DTT
0.1 mM	EDTA
0.5％(v/v)	NP-40
0.5％(v/v)	Tween 20
50％(v/v)	グリセロール

大腸菌株で発現させた組換えXiphophorus maculatus UNG変異体

1 μgのdUを含むdsDNAを25℃、30分の反応で分解できる酵素量を1 Uとする。

50 Uの本酵素と1 μgのpBR322 DNAを37℃で2時間反応させても、DNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。

本酵素は、50℃、10分の熱処理によって、完全かつ不可逆的に失活する。

[PCR キャリーオーバー防止の使用方法]

1. 下記のPCR 反応液を調製する。

   TaKaRa Taq Hot Start Version (5 units/μl)	0.25 μl
   10×PCR Buffer (Mg2+ plus)	5 μl
   dU plus dNTP Mixture（製品コード 4035）	4 μl
   25 mM MgCl2	1.5 μl
   UNG (2 U/μl)	0.5 μl
   Primer 1	10～50 pmol
   Primer 2	10～50 pmol
   Template	1～5 μl
   滅菌精製水	up to 50 μl

2. 25℃で10分反応する。
3. 95℃で2分熱失活する。
4. 続けてPCR反応を行う。

使用例の詳細については、TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit（製品コード 6088）の取扱説明書を確認すること。

• 本酵素の至適使用量は目的によって異なるが、50 μlの反応液あたり通常0.1～1 Uを使用する。
• 本酵素は、一般的なPCRおよびRT-PCRの反応液中で作用する。

－20℃

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