特定領域のDNAメチル化解析に

EpiScope® MSP Kit

  • Methylation Specific PCRのための専用試薬
  • DNAメチル化/非メチル化配列の識別能が大幅に向上
  • リアルタイムPCR検出にもエンドポイント検出にも使用可能
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR R100A R100A EpiScope® MSP Kit
  • ライセンス
200回 ¥61,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR R100B R100B EpiScope® MSP Kit
  • ライセンス
400回 ¥112,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

EpiScope MSP KitはMSP(Methylation Specific PCR、メチル化特異的PCR)解析専用のPCR試薬である。MSP解析では、バイサルファイト処理によりCpG配列のメチル化状態に応じて配列が変わる塩基部位に、メチル化DNA検出用プライマー(M Primer)と非メチル化DNA検出用プライマー(UM Primer)を設計してPCRを行い、増幅の有無によりメチル化または非メチル化を識別する。
本製品は、MSP用の専用酵素と最適化された組成のバッファーにより、バイサルファイト処理されたウラシルを含むDNAを鋳型として、従来のPCR試薬と比較してDNAメチル化/非メチル化配列の識別能が大幅に向上したMSP解析を行うことができる。
リアルタイムモニタリングに適した濃度のSYBR Green I*を含んだ状態で反応系が至適化されており、リアルタイムPCR検出(半定量的な解析も可能)、エンドポイント検出(電気泳動で増幅を確認)の両方を同じ反応条件で行うことができる。

*Molecular Probes Inc.より研究用試薬としてSYBR Green Iライセンスを受けています。
SYBRはMolecular Probes Inc.の登録商標です。

【注意】バイサルファイト処理済みDNAを鋳型として、バイサルファイトシーケンスやCOBRA法のためのPCR増幅を行う場合は、TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)(製品コード R110A/B)の使用を推奨する。

内容

(50 μl反応系、200回)
2×MSP Buffer (Mg2+ plus, dNTP plus)*11 ml×5本
MSP Enzyme240 μl
100×SYBR Green I100 μl
ROX Reference Dye(50×conc.)*2200 μl
ROX Reference Dye II(50×conc.)*2200 μl

*1Mg2+濃度は4 mM(2×)、dNTP濃度は400 μM(2×)。
*2Life TechnologiesのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用する。
  • ROX Reference Dye(50×)を添加する機種
    StepOnePlus Real-Time PCR System(Life Technologies)
  • ROX Reference Dye II(50×)を添加する機種
    ・Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System
    ・Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies)
  • 添加の必要がない機種
    ・Thermal Cycler Dice Real Time System シリーズ(製品コード TP950/TP900/TP700)など
    ・電気泳動による解析を行う通常のPCR装置

保存

-20℃
100×SYBR Green I、ROX Reference Dye、Dye IIは必ず遮光してください。

備考

リアルタイムPCR検出、エンドポイント検出とも同じ反応液組成、PCR条件で反応を行う。エンドポイント検出の場合にも、必ず100×SYBR Green Iを添加する。

使用上の注意

SYBR Green Iは核酸と結合する性質上、変異原性の可能性があるものとして取り扱ってください。また、DMSO溶液のため、組織中に色素が浸透する恐れもありますので、使用に際しては必ず手袋を着用してください。

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