バイサルファイト処理後のDNAのPCR増幅に最適
- ウラシルを多く含むDNAの増幅に最適
- 抗Taq抗体を用いたホットスタートPCR酵素が非特異的増幅を抑え確実に増幅
- GCリッチターゲットもATリッチターゲットもラクラク増幅可能
- 増幅産物の3’末端にはAが付加されるので、そのままTAクローニングに使用可能
製品説明
TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) は、バイサルファイト処理後のウラシルを多く含むDNAを鋳型として、バイサルファイトシーケンスやCOBRA法などのためにPCR増幅を行う際に最適なPCR酵素である。バイサルファイト処理を行ったDNAはPCRの反応性が変化することがあるが、本酵素ではマグネシウム濃度やdNTP 濃度を調整することにより増幅効率、反応特異性を調節できるため、これまで増幅できなかったターゲットに関しても良好な増幅を行うことができる。
本酵素は抗Taq抗体を含むホットスタートPCR用の酵素であり、高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、PCRサイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップを設定する必要はない。
【注意】バイサルファイト処理済みDNAを用いて、メチル化特異的PCR（Methylation Specific PCR: MSP）解析を行う場合には、EpiScope MSP Kit（製品コード R100A/B）の使用を推奨する。
本酵素は抗Taq抗体を含むホットスタートPCR用の酵素であり、高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、PCRサイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップを設定する必要はない。
【注意】バイサルファイト処理済みDNAを用いて、メチル化特異的PCR（Methylation Specific PCR: MSP）解析を行う場合には、EpiScope MSP Kit（製品コード R100A/B）の使用を推奨する。
内容
（200回分、50 μl反応系）
* 【酵素の形状】
| 1． | TaKaRa EpiTaq HS（5 U/μl）* | 250 U |
| 2． | 10×EpiTaq PCR Buffer (Mg2+ free) | 1 ml |
| 3． | dNTP Mixture（各2.5 mM） | 1.2 ml |
| 4． | 25 mM MgCl2 | 1.2 ml |
| 20 mM | Tris-HCl 緩衝液（pH8.0） |
| 100 mM | KCl |
| 0.1 mM | EDTA |
| 1 mM | DTT |
| 0.5％ | Tween 20 |
| 0.5％ | NP-40 |
| 50％ | Glycerol |
＊【活性の定義】
活性化サケ精子DNAを鋳型／プライマーとして用い、74℃において、30分間に10 nmolのdNTPを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。
活性化サケ精子DNAを鋳型／プライマーとして用い、74℃において、30分間に10 nmolのdNTPを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。
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