20 kbの鎖長のターゲットを増幅して、クローニングしたい。
長鎖のPCRには、TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase（製品コード RR370A）またはPrimeSTAR GXL DNA Polymerase（製品コード R050A）を用いると正確な増幅な可能です。これらの酵素で増幅しない場合やより高い増幅効率を求める場合は TaKaRa LA Taq Hot Start Version（製品コード RR042A）をお勧めします。
これらの酵素はすべてヒトゲノムDNA を鋳型とした場合、30 kbまでの増幅が可能です。
長鎖のPCR産物（5 kb以上）は、T-Vectorへのクローニングは効率が悪くなりますのでお勧めできません。 Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End)（製品コード 6027）を用いて、PCR産物の末端平滑化・リン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることをお勧めします。
また、長鎖のDNAを効率良くライゲーションするための試薬として、TaKaRa DNA Ligation Kit LONG（製品コード 6024）の利用もお勧めします。
形質転換には、長鎖DNAに適した E. coli HST08 Premium Competent Cells（製品コード 9128）、エレクトロポレーションにはE. col/ii HST08 Premium Electro-Cells（製品コード 9028）をお勧めします。
これらの酵素はすべてヒトゲノムDNA を鋳型とした場合、30 kbまでの増幅が可能です。
長鎖のPCR産物（5 kb以上）は、T-Vectorへのクローニングは効率が悪くなりますのでお勧めできません。 Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End)（製品コード 6027）を用いて、PCR産物の末端平滑化・リン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることをお勧めします。
また、長鎖のDNAを効率良くライゲーションするための試薬として、TaKaRa DNA Ligation Kit LONG（製品コード 6024）の利用もお勧めします。
形質転換には、長鎖DNAに適した E. coli HST08 Premium Competent Cells（製品コード 9128）、エレクトロポレーションにはE. col/ii HST08 Premium Electro-Cells（製品コード 9028）をお勧めします。
※実験の成功を保証するものではないことを予めご了承ください。
