E. coli HST08 Premium Electro-Cells

Electro-Cellsは、エレクトロポレーション法のために調製したコンピテントセルである。この方法は高電圧パルスで細胞膜を破断することにより DNAを細胞内に移入するもので、形質転換効率および結果の再現性に優れており、少量のサンプルを短時間で大腸菌に導入する際、特に威力を発揮する。
E. coli HST08 Premiumは外来のメチル化DNAを切断する遺伝子群mrr-hsdRMS-mcrBC, とmcrAを欠失している。その上、非常に高い形質転換能力を持っているため、メチル化されたDNAのクローニングから、遺伝子ライブラリーの作製、BACベクターなどを使用した長鎖ゲノムライブラリー作製等に広く使用できる。
また長鎖プラスミドDNAの形質転換能力にも優れており、同様の遺伝子型を持つ他のコンピテントセルと比較してコロニー形成速度も速いため、TaKaRa DNA Ligation Kit LONG（製品コード 6024）と組み合わせることで、10 kb以上の長鎖DNA断片のクローニングやライブラリー作製も容易に行える。
pUC系プラスミドでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal添加により組換え体の選別が容易となる。
(X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside)

E. coli HST08 Premium Electro-Cells	50 μl×10本
pUC19 DNA (10 pg/μl)	10 μl
SOC Medium*	1 ml×10本

【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

－80℃

1）形質転換効率
取扱説明書の方法に従い、10 pgのpUC19プラスミドDNAで形質転換し、Amp⁺のプレートでコロニーを選別した。このとき、>1×10⁹ transformans/μl pUC19プラスミドDNAの効率を得た。
2）β-ガラクトシダーゼのα-相補性の確認
pUC19DNAを用いて形質転換を行い、100 μg/mlのアンピシリン、60 μg/ml X-Galを含む L-寒天培地にプレートした場合、青色のコロニーが出現することを確認している。

F^－, endA1, supE44, thi-1, recA1, relA1, gyrA96, phoA, Φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF)U169, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, λ^－

1×10¹⁰ bacteria/ml