PrimeSTAR® GXL Premix Fastシリーズ

GCリッチ・ATリッチターゲットの増幅

非特異的な増幅がおこりやすいGC rich・AT richな鋳型においても、 PrimeSTAR GXL Premix Fast(製品コード R053A)では、特別なバッファーや反応条件を設定することなく、PCR伸長条件「5 sec./kb」にて特異性の高い増幅が可能である。

(1)GCリッチターゲットの増幅

鋳型:T.thermophilus HB8 ゲノムDNA(100 ng/50 μl 反応系)
1.0.5 kb(GC含量 72%)
2.2 kb(GC含量 74%)
3.4 kb(GC含量 73%)
4.5 kb(GC含量 73%)
M.λ-Hind III digest

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①PrimeSTAR GXL
Premix Fast
(製品コード R053A)

②PrimeSTAR GXL
Premix
(製品コード R051A)
③A社酵素
④B社酵素
⑤C社酵素

(弊社比較データ)


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鋳型の鎖長と
所要時間
①製品コード R053A ②製品コード R051A ③A社酵素 ④B社酵素 ⑤C社酵素
2 kb 39分 1時間39分 58分 1時間19分 39分
5 kb 47分 3時間9分 1時間43分 2時間7分 47分
*伸長
時間設定
5 sec./kb 1 min./kb 30 sec./kb 30 sec./kb 5 sec./kb

反応条件:各社推奨条件で実施

サーマルサイクラー:Clontech PCR Thermal Cycler GP(製品コード WN400)使用

A社酵素、B社酵素:High Fidelity PCR酵素、C社酵素:High Speed PCR酵素素




(2)ATリッチターゲットの増幅

鋳型:ヒトゲノム DNA(100 ng/50 μl 反応系)
1.0.5 kb(GC含量 72%)
2.2 kb(GC含量 74%)
3.4 kb(GC含量 73%)
4.5 kb(GC含量 73%)
M.λ-Hind III digest

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①PrimeSTAR GXL
Premix Fast, Dye plus
(製品コード R052A)
②PrimeSTAR GXL
Polymerase
(製品コード R050A
③C社酵素

(弊社比較データ)


PCR条件:
98℃ 10 sec.
30 cycles
60℃ 5 sec.
68℃/kb 5 sec./kb
製品コード R050A:高速PCRプロトコールにて実施

サーマルサイクラー:TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(終売)使用
C社酵素:High Speed PCR酵素

  PrimeSTAR® GXL Premix Fastシリーズ