PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2

増幅鎖長

（1）ヒトゲノムDNA

ヒトゲノムDNAを鋳型として、各社推奨PCR条件にて増幅可能なサイズを確認しました。
PrimeSTAR Max DNA Polymerase Ver.2（製品コード R047A）では、伸長時間5 sec./kbまたは10 sec./kbの高速反応において15 kbまでの良好な増幅を確認しました。15 kbの増幅にかかる時間は1時間42分でした。

鋳型：ヒトゲノムDNA（100 ng/50 μl反応系）
1． 0.5 kb
2． 1 kb
3． 2 kb
4． 3 kb
5． 4 kb
6． 7.5 kb
7． 10 kb
8． 15 kb

所要時間
（15 kb）
①PrimeSTAR Max
DNA Polymerase Ver.2
（製品コード R047A）

1時間42分
②PrimeSTAR Max
DNA Polymerase
（製品コード R045A）

1時間42分
③A社酵素

4時間12分
④B社酵素

4時間12分
（弊社比較データ）

反応条件：各社推奨条件で実施

PrimeSTARのPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
68℃
10 sec.
5 or 15 sec.
5 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長＞6 kb
98℃
68℃
10 sec.
10 sec./kb
30 cycles
A社およびB社酵素のPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
60℃
72℃
10 sec.
10 sec.
30 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長＞6 kb
98℃
68℃
10 sec.
30 sec./kb
30 cycles


サーマルサイクラー：Clontech PCR Thermal Cycler GP（製品コード WN400）使用
A社酵素、B社酵素：High Fidelity PCR酵素

（2）ヒトcDNA

ヒトcDNAを鋳型として、各社推奨PCR条件にて増幅可能なサイズを確認しました。
PrimeSTAR Max DNA Polymerase Ver.2 （製品コード R047A）では、伸長時間10 sec./kbの高速反応において6 kbまでの良好な増幅を確認しました。また、伸長時間20 sec./kbの反応において8 kbの良好な増幅を確認しました（12 kbの増幅も視認できました）。6 kbの増幅にかかる時間は1時間6分でした。

鋳型：ヒト cDNA（Total RNA 250 ng相当／50 μl反応系）
1． 1 kb
2． 2 kb
3． 4 kb
4． 6 kb
5． 8 kb
6． 12 kb

所要時間
（6 kb）
①PrimeSTAR Max
DNA Polymerase Ver.2
（製品コード R047A）

1時間6分
②PrimeSTAR Max
DNA Polymerase
（製品コード R045A）

1時間6分
③A社酵素

2時間7分
④B社酵素

2時間7分
（弊社比較データ）

反応条件：各社推奨条件で実施

PrimeSTARのPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
68℃
10 sec.
5 or 15 sec.
10 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長＞6 kb
98℃
68℃
10 sec.
20 sec./kb
30 cycles
A社およびB社酵素のPCR条件
増幅鎖長≦6 kb
98℃
55℃
72℃
10 sec.
10 sec.
30 sec./kb
30 cycles
増幅鎖長＞6 kb
98℃
72℃
10 sec.
30 sec./kb
30 cycles

※鋳型がcDNAの場合、上記の伸長時間で設定

サーマルサイクラー：Clontech PCR Thermal Cycler GP（製品コード WN400）使用
A社酵素、B社酵素：High Fidelity PCR酵素

  PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2