抗Taq抗体と結合させたTaKaRa Ex Taq®
反応用バッファー添付＋dNTP
製品説明
TaKaRa Ex Taqは、LA PCRの原理を応用した3’→5’exonuclease活性（proof reading活性）を持つ耐熱性DNA Polymeraseである。通常のPCR条件下において、従来のTaq DNA Polymeraseと比べて、高い増幅効率、低いエラー率で高感度のPCRを実現できる。
本製品で使用しているTaKaRa Ex Taq HSは、抗Taq抗体とTaKaRa Ex Taqを混合したもので、ホットスタートPCR用の酵素である。高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、サイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップは必要なく、従来のPCR条件で使用できる。
本製品で使用しているTaKaRa Ex Taq HSは、抗Taq抗体とTaKaRa Ex Taqを混合したもので、ホットスタートPCR用の酵素である。高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、サイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップは必要なく、従来のPCR条件で使用できる。
内容
（250 U）
| TaKaRa Ex Taq HS （5 U/μl） | 50 μl |
| 10×Ex Taq Buffer （20 mM Mg2＋ plus） | 1 ml |
| dNTP Mixture （各2.5 mM） | 800 μl |
保存
－20℃
形状
| 20 mM | Tris-HCl （pH8.0） |
| 100 mM | KCl |
| 0.1 mM | EDTA |
| 1 mM | DTT |
| 0.5％ | Tween 20 |
| 0.5％ | NP-40 |
| 50％ | Glycerol |
添付dNTP Mixture*
| 濃度 | 各2.5 mM |
| 形状 | 水溶液（ナトリウム塩）pH7～9 |
| 純度 | 各98％以上 |
* dATP、dCTP、dGTP、dTTPの等モル混合物で、希釈せずにそのままPCR反応に用いることができる。
活性の定義
活性化サケ精子DNAを鋳型／プライマーとして用い、下記の活性測定用反応液中にて74℃において、30分間に10 nmolの全ヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。
活性測定用反応液組成
| 25 mM | TAPS緩衝液 （pH9.3、25℃） |
| 50 mM | KCl |
| 2 mM | MgCl2 |
| 0.1 mM | DTT |
| 各200 μM | dATP・dGTP・dCTP |
| 100 μM | [3H]-dTTP |
| 0.25 mg/ml | 活性化サケ精子DNA |
純度
●10 Uの本酵素と0.6 μgのλ-Hind III分解物とを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのsupercoiled pBR322 DNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのλDNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのsupercoiled pBR322 DNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのλDNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
用途
Hot Start Polymerase Chain Reaction (PCR)法によるDNA増幅
PCR産物について
TaKaRa Ex Taq HSを用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3’末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-Vector［pMD20（製品コード 3270）、pMD19 (Simple)（製品コード 3271）など］にクローニングすることができる。また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。
品質管理データ
性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。
一般的なPCR反応液量（Total 50 μl）
| TaKaRa Ex Taq HS（5 U/μl） | 0.25 μl |
| 10×Ex Taq Buffer（Mg2+ plus） | 5 μl |
| dNTP Mixture（各2.5 mM） | 4 μl |
| Template | ＜500 ng |
| Primer 1 | 0.2～1.0 μM （final conc.） |
| Primer 2 | 0.2～1.0 μM （final conc.） |
| 滅菌精製水 | up to 50 μl |
補足資料
「タカラバイオ PCR Enzymes Guide」では、PCR酵素・関連製品とそのアプリケーションをご紹介しています。
下記よりPDFでご覧いただけます。
冊子のお届けは、こちらからご請求ください。
下記よりPDFでご覧いただけます。
冊子のお届けは、こちらからご請求ください。
Application
大腸菌ゲノムDNAを鋳型として鋳型量を変えて増幅
λDNAを鋳型として様々なサイズの領域を増幅
BIO VIEW / Clontechniques
microRNAのプロファイリングを目的としたmicroRNA cloning
Multiplex PCR Assay Kitの極め付けの反応特異性をあなたのPCRにお役立てください！
この製品を見た人は、
こんな製品も見ています
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
