PCR用プレミックス試薬シリーズ(Hot Start Version)

2×Premix PCR Solution
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
R028A

TKR

タカラバイオ(株)
Premix Taq™ Hot Start Version (500 μl×5本)
100回(50 μl反応系) ¥22,000
説明書・データシート・ベクター情報
R028A
RR030A

TKR

タカラバイオ(株)
Premix Ex Taq™ Hot Start Version (500 μl×5本)
100回(50 μl反応系) ¥24,000
説明書・データシート・ベクター情報
RR030A
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製品説明

本製品は、ホットスタートPCR用のDNAポリメラーゼ、反応バッファー、dNTP Mixtureをあらかじめ2倍濃度で混合したものである。TaKaRa Taq HS、TaKaRa Ex Taq HSは、抗Taq抗体とTaKaRa TaqあるいはTaKaRa Ex Taqを混合したホットスタートPCR用の酵素で、高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、サイクル前のミスプライミングやプライマーダイマ-に由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体は、PCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、従来のPCR条件で反応できる。抗Taq抗体を失活させるための特別なステップは必要ない。

保存

-20℃保存(4℃で3ヵ月保存可能)

注)過度な凍結融解の繰り返しは活性が低下する場合があります。使用頻度が高い場合、いったん融解したものは4℃保存をお勧めします。使用前には、転倒混和後スピンダウンしてください。

組成

Premix Taq Hot Start Version (製品コード R028A)
TaKaRa Taq HS 1.25 U/25 μl
dNTP Mixture 2×conc. ;各0.4 mM
PCR Buffer 2×conc. ;20 mM Tris-HCl (pH8.9), 100 mM KCl, 3 mM MgCl2


Premix Ex Taq Hot Start Version (製品コード RR030A)
TaKaRa Ex Taq HS 1.25 U/25 μl
dNTP Mixture 2×conc. ;各0.4 mM
Ex Taq Buffer 2×conc. ;4 mM Mg2+を含む

用途

Hot Start PCR法によるDNA増幅

PCR産物について

Premix Taq Hot Start Version、Premix Ex Taq Hot Start Versionを用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3’末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-vector[pMD20(製品コード 3270)、pMD19(simple)(製品コード3271)など]にクローニングすることができる。また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

品質管理データ

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis(CoA)をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

PCR反応例 (total 50μl PCR)

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Premix Ex Taq Hot Start Version or Premix Taq Hot Start Version* 25 μl
Template <500 ng
Primer 1 0.2~1.0 μM(final conc.)
Primer 2 0.2~1.0 μM(final conc.)
滅菌精製水 up to 50 μl
* 均一になるまでゆるやかに転倒混合して使用する。

PCR条件

PCRの最初のDNA変性ステップで抗Taq抗体は失活するので、従来のPCR条件が使用できる。抗Taq抗体を失活させるための特別なステップは必要ない。

横にスクロールできます
(例) 1 kb DNAを増幅する時
98℃
55℃
72℃
10 sec.
30 sec.
1 min.
 
30 cycles or 98℃
68℃
10 sec.
1 min.
 
30 cycles

注) 変性条件は、サーマルサイクラーの使用機種と反応チューブの種類に合わせて設定する。設定の目安は、94℃ 20~30 sec.、あるいは98℃ 5~10 sec.
注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
  • タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
    また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。
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