熱感受性が高く、安定したPCR結果が得られます
製品説明
Uracil DNA Glycosylase (UNG)は、ウラシルを含むDNA中のデオキシリボースとウラシル塩基の間のN-グリコシド結合を加水分解し、脱ピリミジン部位を作る。本酵素は、一本鎖と二本鎖のウラシルを含むDNAを加水分解するが、RNAに対しては作用しない。
形状
| 20 mM | Tris-HCl, pH8.0 (at 4℃) |
| 100 mM | KCl |
| 1 mM | DTT |
| 0.1 mM | EDTA |
| 0.5％(v/v) | NP-40 |
| 0.5％(v/v) | Tween 20 |
| 50％(v/v) | グリセロール |
起源
大腸菌株で発現させた組換えXiphophorus maculatus UNG変異体
活性の定義
1 μgのdUを含むdsDNAを25℃、30分の反応で分解できる酵素量を1 Uとする。
品質管理データ
性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。
熱失活
本酵素は、50℃、10分の熱処理によって、完全かつ不可逆的に失活する。
使用例
[PCR キャリーオーバー防止の使用方法]
- 下記のPCR 反応液を調製する。
TaKaRa Taq Hot Start Version (5 units/μl) 0.25 μl 10×PCR Buffer (Mg2+ plus) 5 μl dU plus dNTP Mixture（製品コード 4035） 4 μl 25 mM MgCl2 1.5 μl UNG (2 U/μl) 0.5 μl Primer 1 10～50 pmol Primer 2 10～50 pmol Template 1～5 μl 滅菌精製水 up to 50 μl - 25℃で10分反応する。
- 95℃で2分熱失活する。
- 続けてPCR反応を行う。
- 本酵素の至適使用量は目的によって異なるが、50 μlの反応液あたり通常0.1～1 Uを使用する。
- 本酵素は、一般的なPCRおよびRT-PCRの反応液中で作用する。
保存
－20℃
- 注意事項
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