Xfect™ mESCトランスフェクション試薬

Xfect mESC Transfection Reagentはマウス胚性幹（ES）細胞に最適化されたトランスフェクション試薬である。本試薬による遺伝子導入は、約2,300種類もの中から選び出されたXfect mESC Polymerにより形成される生分解性ナノ粒子を介して行われる。この新しい遺伝子導入原理により、これまでにない高い導入効率が得られる一方で、遺伝子導入試薬によるES細胞に対する毒性は低く抑えられている。また、遺伝子導入は、通常の血清含有培地中で行うことができるため、操作も簡便である。

Xfect mESC Transfection Reagentでは高い遺伝子導入効率と細胞生存率が得られる（図1）。市販の3種類の遺伝子導入試薬とXfect mESC Transfection Reagentを比較したところ、E14TG2AおよびD3マウスES細胞のいずれにおいても、Xfect mESC Transfection Reagentを用いた場合に他社試薬よりも高い導入効率が得られた（図2、3）。


図1. Xfect mESC Transfection ReagentによるマウスES細胞への高効率な遺伝子導入例
Xfect mESC Transfection Reagentを用いてE14TG2AマウスES細胞にDsRed-Express2発現プラスミドを導入した。48時間後、フローサイトメーターとトリパンブルー染色により遺伝子導入効率と細胞生存率を測定したところ、93.9%の細胞に遺伝子導入が確認され（MFI＝716.9 パネルA）、細胞生存率は84%であった（パネルB、C）。


図2. Xfect mESC Transfection Reagentと他社遺伝子導入試薬を用いたマウスES細胞株への遺伝子導入例-1
Xfect mESC Transfection Reagentと他社製品L、LX、Fを用い、それぞれの推奨プロトコールに従ってAcGFP1をコードするプラスミドDNAをE14TG2AおよびD3マウスES細胞に導入した。48時間後、AcGFP1の発現をフローサイトメーターを用いて解析し、遺伝子導入効率を算出、比較した。


図3. Xfect mESC Transfection Reagentと他社遺伝子導入試薬を用いたマウスES細胞株への遺伝子導入例-2
Xfect mESC Transfection Reagent（パネルA）と他社製品L（パネルB）、他社製品LX（パネルC）、他社製品F（パネルD）を用い、それぞれの推奨プロトコールに従ってAcGFP1をコードするプラスミドDNAをE14TG2AマウスES細胞に導入した。48時間後、AcGFP1の発現を白色光下（パネル上段）またはGFP用フィルターを装着したZeiss Axioskopを用いて観察した（パネル下段）。


図4. Xfect mESC Transfection Reagentを用いた実験概要
Xfect mESC Transfection Reagentでは遺伝子導入操作を血清存在下で行うことができ、操作ステップも最小限に抑えることができる。

Xfect mESC Transfection Reagent
（製品コード 631320：100回^＊）
・Xfect mESC Polymer
・Xfect Reaction Buffer

* 6ウェルフォーマットプレートの1ウェルでの反応回数

－20℃