動物や細胞にsiRNAを投与しRNA干渉による特定遺伝子のノックダウン効果を検証することにより、医薬品としてのsiRNAの利用が検討されている。
本製品は合成siRNAの定量を目的としたコアキットで、リアルタイムPCR解析と組み合わせることにより、投与した合成siRNAの残存量を、細胞、組織、血液などから抽出したtotal RNAをサンプルとして測定することができる。
siRNAを化学合成する際には、一般的に3’末端にデオキシチミン(dT)2塩基のオーバーハングを付加する。本製品では、この3’オーバーハングにポリデオキシアデニン(ポリdA)を付加した後、特別に設計したOligo dT Primerを用いて逆転写反応を行うことにより、total RNA存在下でも合成siRNA分子から相補的なcDNAを調製することができる。調製されたcDNAを鋳型として、TB Green
Premix Ex Taq II(Tli RNaseH Plus)(製品コード RR820S/A/B)などを用いたインターカレーター法のリアルタイムPCRを行うことにより、合成siRNAの高感度な定量を行う。
Synthetic siRNA Quantitation Kit (with TB Green
Premix Ex Taq II Tli)(製品コード RR861A)は、本製品(製品コード 6142)と
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)(製品コード RR820A)のセット品である。
<注意>
本製品は、3’オーバーハングがデオキシチミンd(TT)である合成siRNAの定量に使用できる。
3’オーバーハングとしてd(TT)以外のDNA配列が付加された合成siRNAの場合、配列を変更したOligo dT Primerを別途用意すれば、本製品を使用できる。
3’オーバーハングの付加がない、または3’オーバーハングがRNAである合成siRNAの場合は、本製品を使用できない。